酶的动力学性质分析,是酶学研究的重要方面。
测定Km 和Vmax,特别是测定Km,是酶学研究的基本内容之一,Km是酶的一个基本的特性常数,它包含着酶与底物结合和解离的性质,特别是同一种酶能够作用于几种不同的底物时,米氏常数Km往往可以反映出酶与各种底物的亲和力强弱,Km值越大,说明酶与底物的亲和力越弱,反之,Km值越小,酶与底物的亲和力越强。
2. 底物浓度对酶活性的影响
实验原理
Michaelis-Menten ics
实验原理
实验原理
Lineweaver-Burk ics
实验原理(双倒数作图法)
蔗糖酶的准备
酶粉溶于10ml—20ml蒸馏水,离心10,000rpm离心10分钟后去掉不溶物。
酶活力预试
1
2(对照)
10%蔗糖溶液ml
H2O
25℃水浴中保温3min
稀释后的蔗糖酶溶液ml
25℃水浴5min
沸水浴煮5min
取出后经自来水冷却3min,以标准曲线的“0”管调零点,
于520nm处测光密度值。-。
底物浓度与酶促反应速度
管号
试剂
1
2
3
4
5
6
7
10%蔗糖溶液ml
H2O
,ml
25℃
预热
3分钟
25℃准确反应5min,,
混匀,沸水浴5min,
实验八 蔗糖酶km测定-课件(ppt·精·选) 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.