高速逆流色谱.ppt

高速逆流色谱
一、概述
高速逆流色谱(High-Speed Countercurrent
Chromatography,)是一种连续高效的液-
液分配色谱分离技术。该技术不需要固体支撑
体,主要依据物质在两相中分配系数的不同对物
质进行分离,相对其他常用色谱(如柱色谱、高
效液相色谱等)来说,具有无不可逆吸附和回收
率高的特点,特别适合于天然活性成分的分离。
技术最早是由美国国立卫生院Ito博士研
制应用,技术应用较早,技
术发展十分迅速,在过去20~30年中,出现了
一系列新型的分离技术,积累了大量的科研成
果,自1995年以来,国外已有5本英文专著出
版,我国目前也有两本中文专著出版。
二、色谱工作原理
色谱包括储液罐、泵、螺旋管分离
柱、检测器、色谱工作站或数据采集软件或记
录仪以及馏分收集器等部分。
选择溶剂体系
平衡
选择固定相
充满螺旋管柱
高速旋转螺旋管
泵入
流动相
流动相流出,注入待分离的样品
收集馏分
分
离
效
果
溶剂系统
固定相
流动相
洗脱方式、流动相的流速
仪器的旋转方向和转速
样品浓度和进样方式
柱温等
检测器
紫外-可见光检测器
蒸发光散射检测器
质谱检测器等
http://video./v/b/18615566-
http://video./v/b/18605037-
与其它色谱分离技术相比,高速逆流色谱具有如下特点:
分离效率高
制备量大
操作灵活
回收率高
应用范围广
分离成本低
三、溶剂体系的要求
1 溶剂体系的种类
弱极性溶剂体系
中等极性溶剂体系
强极性溶剂体系
两相由正己烷和水组成,可用甲醇、乙醇、醋酸
乙酯等来调节溶剂系统的极性。
典型的溶剂体系有:
正己烷-醋酸乙酯-乙醇-水
正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水