下载此文档

D-氨甲酰水解酶可溶性表达的遗传改造和结构与功能研究的中期报告.docx


文档分类:论文 | 页数:约2页 举报非法文档有奖
1/2
下载提示
  • 1.该资料是网友上传的,本站提供全文预览,预览什么样,下载就什么样。
  • 2.下载该文档所得收入归上传者、原创者。
  • 3.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
1/2 下载此文档
文档列表 文档介绍
该【D-氨甲酰水解酶可溶性表达的遗传改造和结构与功能研究的中期报告 】是由【niuww】上传分享,文档一共【2】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【D-氨甲酰水解酶可溶性表达的遗传改造和结构与功能研究的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。D-氨甲酰水解酶可溶性表达的遗传改造和结构与功能研究的中期报告本研究旨在通过遗传改造和结构与功能研究,提高D-氨甲酰水解酶的可溶性表达,并深入探究其催化机理。本次报告为中期报告,总结了目前已完成和正在进行的工作。一、遗传改造通过基因工程方法,对D-氨甲酰水解酶基因进行改造。首先,构建了载体pET-28a-DAAO,将D-氨甲酰水解酶基因克隆进载体中。其次,进行点突变,设计出4种突变体,分别为DAAO(A117V)、DAAO(G222R)、DAAO(A117V/G222R)和DAAO(A117V/G222R/L301F),并利用重叠延伸PCR方法进行突变。其中,A117V突变体和G222R突变体分别针对D-氨甲酰水解酶的两个关键位点进行突变,旨在增强其催化效率和稳定性。A117V/G222R双突变体则将两个突变位点组合起来,再加上L301F突变位点,预期能进一步提高产物得率和催化速率。二、可溶性表达通过不同的表达条件和策略,达到提高D-氨甲酰水解酶可溶性表达的目的。目前已成功构建了三种表达菌株,(DE3),(DE3)(DE3)。同时,参照相关文献,优化了细胞培养条件,例如温度、诱导时间、诱导剂浓度等,以增加可溶性表达量。使用Westernblot和SDS-PAGE等方法对获得的重组蛋白进行了鉴定和分析。三、结构与功能研究利用X射线晶体学和质谱等技术手段,深入探究D-氨甲酰水解酶的结构和催化机理。目前已成功获得了D-氨甲酰水解酶的晶体,并进行了X射线衍射实验。通过数据处理和晶体学分析,我们确定了D-氨甲酰水解酶的空间结构并绘制了其3D模型。此外,利用质谱技术,鉴定了D-氨甲酰水解酶在催化过程中的重要中间产物和代谢产物,揭示了其催化机理的关键环节和催化途径。综上,本次中期报告展示了我们在D-氨甲酰水解酶可溶性表达和结构与功能研究方面的初步进展。接下来,我们将继续进行优化实验,深入探究D-氨甲酰水解酶的催化机理,为其应用和产业化奠定基础。

D-氨甲酰水解酶可溶性表达的遗传改造和结构与功能研究的中期报告 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.