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该【Poly I：C诱导草鱼cDNA表达文库的构建的中期报告 】是由【niuwk】上传分享，文档一共【1】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【Poly I：C诱导草鱼cDNA表达文库的构建的中期报告 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。PolyI:C诱导草鱼cDNA表达文库的构建的中期报告在构建草鱼cDNA表达文库的过程中,我们选择使用PolyI:C作为诱导剂,以提高对于诱导剂的响应性。目前,我们已经完成了文库构建的中期工作,并且进行了初步的筛选。首先,我们从草鱼组织中提取了总RNA,并使用Oligo(dT)磁珠纯化得到了mRNA。然后,我们使用随机引物进行一步反转录,产生了一系列不完整的cDNA。接着,我们利用SfiI限制酶切割产生带有SfiI位点的cDNA,这一步操作同时切割cDNA的两端,用于后续文库的克隆。接下来,我们将经过SfiI限制酶切割的cDN***段进行可克隆化处理,并进行电转化和筛选,得到了约10万个白色克隆。然后,我们进行了PCR扩增、测序及序列分析,初步评估了文库的质量和重复率。目前,我们已经成功地得到了一批高质量的cDNA克隆,为后续的功能筛选提供了良好的基础。在文库构建中的下一步工作中,我们将持续进行克隆筛选、序列分析,以及进行进一步的功能鉴定和分析,以期能够得到更加优质的cDNA文库。
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