神经酰胺修饰醇质体的制备与表征.pdf

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】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。万方数据神经酰***修饰醇质体的制备与表征贾利萍,杨成唬梁蓉,摘要:为了提高醇质体的稳定性,作者采用神经酰***Ⅲ螅珻修饰醇质体。首先考察了质量浓度对醇质体稳定性的影响,—醇质体的稳定性、稳定机制及体外释放性能。结果显示,当质量浓度为/时,醇质体的稳定性最好。—醇质体的质量浓度为/时,粒径为±椅麓⒋夤酆土>毒廾飨员浠射线衍射和全反射傅里叶红外光谱表明被包载于醇质体中,同时,红外光谱图也说明了与醇质体存在氢键相互作用。研究表明,的加入会降低醇质体流动性从而提高其稳定性,且—醇质体具有较好的体外释放性能。关键词:神经酰***:醇质体:视黄醇棕榈酸酯;乙醇注入法中图分类号:文章编号:—一一,±,江苏无锡;洗笱Ш铣捎肷锝禾褰逃恐氐闶笛槭遥琑作为脂簂痡..—...。抒:,瑀琫无锡Ⅳ一,.琖,呵,,:畂..,猻瑂骰—甌/甔—癳琣現基金项目:国家重点研发计划项目。ㄐ抛髡撸毫喝一┦浚苯淌冢妒垦芯可际Γ饕4邮陆禾寤а芯俊—:卿“甤琂,.琂秽阹收稿日期:一一畁万方数据,食品加工通常伴随着复杂的条件,各类活性物质在这些条件下往往难以稳定存在,脂质体能够有效提高各类活性物的稳定性,在各种生物活性化合物的封装巾起着重要作用?。醇质体一种新型脂质体,由低相对分子质量醇、水和磷脂组成,具有多层囊泡结构,能包封多类药物。相较于其他载体,醇质体无毒性、无刺激揖哂辛己玫流动性和生物利用度,在经皮给药和口服给药中都有重要应用,但其存在稳定性差的问题网。为了解决醇质体稳定性差的问题,通常可以将醇质体巾的乙醇替换成黏度较大的醇类如丙二醇『、丙纪龋灰部梢酝ü砑右恍┠ば奘渭寥壳聚糖『来提高其稳定性。神经酰***作为一种功能性食品和化妆品中的活性成分,具有提高免疫力以及修复皮肤屏障的作用延醒芯勘砻鳎窬0可参与形成双层膜卜;谏窬0返闹侍濉璴、神经酰***共组装纳米载体¨蜕窬0返哪遗菥蒷也都已经被应用到皮肤给药当中。妊芯苛对脂质体的影响,结果表明随着的加入,双层膜相变温度向高温移动,在一定程度上降低了脂质体的流动性。载体的流动性越低,稳定性越高。凶此,作者将作为膜修饰剂加入醇质体,研究对于醇质体的影响,以期通过改变醇质体流动性来提高载体的稳定性。为了进一步探究修饰醇质体的性能,需选择一种脂溶性活性物作为芯材。是一种重要的维生素苌铮哂锌寡趸⒖顾ダ虾臀终视功能及免疫功能的作用,凶而被广泛应用于食品、保健品旧⑺橇咸砑蛹痢⒒逼肪蒷等方面。视黄醇类物质对哺乳动物至关重要,必须由食物提供。蛴谑踊拼技洳晃榷ǎ称分谐R越衔N榷ǖ代替视黄醇。然而,对氧化、光、热、水分和金属的不稳定性限制了其存食品加工中的应用,凶此,作者将作为活性物制备修饰的醇质体,、材料与试剂神经酰***Ⅲ螅珻:上海言臻贸易有限公司产品;卵磷脂汉颖泵酪滴股锛际跤邢薰静罚菏踊醇棕榈酸酯琑:荷兰帝斯曼国邢薰静罚坏ㄍ纯度%罕本┮僚悼科技有限公司产品:甲醇、乙醇:上海泰坦科技有限公司产品。漩涡振荡器:德国静罚一集热式恒温加热磁力搅拌器:巩义市予华仪器有限责任公司产品:型电位及纳米粒度分析仪:美国公司产品:微电脑人蛳洌荷虾2迅实业有限公司产品:湎哐苌湟牵旱鹿悸克邢薰静罚篘—全反射傅里叶红外光谱仪、超高效液相色谱仪:美国赛默飞世尔科技公司产品;差示扫描量热仪:德国耐驰仪器制造有限公司产品。空白醇质体和空白醇质体的制备见图2捎靡掖甲⑷敕ɡ票噶丝瞻醇质体和空白醇质体。称取一定量的、胆同醇于烧杯中,接着加入适量乙醇,将该混合物置于℃水浴锅中加热至澄清透明,得到有机相涣砣烧杯,将适量乙醇溶液矾矿,谷肫渲校嫠〖尤龋次K郆;注射器吸取有机相郝人俚刈⑷胨吹每瞻状贾侍濉?瞻證贾侍宓闹票赣肟瞻醇质体相同,不同之处在于,有机相行枰<尤适量的共同加热溶解。醇质体中的质量浓度依次为......不同质量浓度的贾侍逯票覆握丈述方法,使醇质体中质量浓度固定为将称量的加入有机相餐尤热芙猓勾贾体中的质量浓度依次为、、、、、蝝吸取醇质体于离心管中,加入去离子水进行稀释,然后于姓竦雌魃险竦蛊浠旌均匀。在℃下使,』电位及纳米粒度分析仪进行测量,℃和下储藏,每隔若干天记录其外观变化并取适量醇质体在电位及纳米粒度分析仪中进行粒径测量,用软件分析其粒径变化。仪器与设备研究方法醇质体的制备用鴑醇质体的粒径测定,.苫磊短О卧嫜П甑淼期万方数据匪重汾新水礓叭朋敝≥醇质体的流变特性采用流变仪对含不同质量浓度../拇贾侍褰形忍流变测试。测试在℃下进行,测量选择直径为的铝板,剪切速率为一褐醇质体的湎哐苌浔碚取适量、醇质体、—醇质体进行湎哐射分析,检测条件如下:靶射线源,电流为,电压为,扫描角度臼。~。,扫描速率为。痬。醇质体的全反射傅里叶红外光谱表征扫描空气背景峰后,用巴氏滴管分别吸取一定量的、空白醇质体、醇质体、空白醇质体和—醇质体滴加在全反射傅里叶红外光谱仪的激光探头上,并使其覆盖激光探头,在连续扫描次,即得到、空白醇质体、醇质体、空白醇质体和—醇质体的红外光谱图。醇质体的差示扫描量热分析分别准确称取空白醇质体、空白醇质体、醇质体、—醇质体置于¨穆鳞巅鲋校尖头镊子将铝坩埚放入瞧髦写猓钥瞻茁坩埚作为对照。加热温度为一~℃,升温速率为妫痬,氮气流量为痬。利用差示扫描量热仪白带的软件分析相变温度并计算焓变,导出数据后利用进行数据分析。:贾侍宓奶逋馐头徘卟慰颊跃驳的方法并适当修改,采用动态透析法考察—醇质体的体外释放特征。取—醇质体柿颗ǘ染./糜谠ご砉耐析袋中,将其投入的释放介质寤质%的乙醇溶液与为的中。释放介质温度为℃,转速痬。分别于不同时间点取出释放介质,同时补充等体积的释放介质,重复巍S酶咝б合嗌追ú舛ú⒓扑闼∈头介质中的质量,计算累积释放率。疩×式中:@刍头怕剩ィ蝗晕猣时药物释放量,;M兑┳苤柿浚琺R匀⊙蔽饰:嶙辏药物累积释放率为纵坐标,绘制体外释放曲线。各组实验均重复危捎镁值±标准差表示实验结果。、℃下空白醇质体和空白醇质体外观和粒径随时问的变化进行了测定和分析,结果见图T嫦麓⒉瞻状贾侍搴涂白醇质体的外观和粒径均无明显变化,而在下储藏瞻状贾侍逵煞鹤爬豆獾某吻逋明溶液变得逐渐浑浊,粒径也由±黾至..,空白醇质体的外观和粒径都未发生明显变化。以上结果表明,的加人有利于提高醇质体的热稳定性。。.。继水相。縸【二一,:加芙注入有机相加热水合冷却争生湍ā自万方数据醇质体的外观由澄清透明变为乳白色凝胶状固体,其粒径也随之增加。在℃储藏螅的质量浓度为./时,醇质体均南澄清透明逐渐变浑浊,粒径分别南±..;当质量浓度为蝝/时,其外观和粒径都基本不变。当质量浓度≥/,随着储存时问延长逐渐有白色物质析出,且其粒径也增加至超出纳米粒度仪测量范同,说明当质量浓度≥/时,醇质体不稳定。当质量浓度为/一时,醇质体的稳定性最佳。确⑾质杷实ü檀己蜕窬0房捎某些磷脂共同形成双分子层【状俗髡咛岢龃醇质体中、和胆固醇共同形成了双层膜。,对膜的稳定性影响较小:而当质量浓度为力口至...增力口至/贾利萍,等:神经酰***修饰醇质体的制备与表征趋瞻譪贾侍辶>>侗浠一样上方标记数据为对应的质量浓度,蝝℃时质量浓度对空白醇质体外观与粒径的影响℃譬矗#唬对甑淼期畎状贾侍逋夤浒譪贾侍逋夤媸巢质量浓度/痬夤>图∞∞∞∞如∞∞∞∞加曼。/,双层膜中的磷脂、胆同醇和能够形成稳定的三元体系,从而使膜的稳定性得到提高。当质量浓度进一步提高,大量的与双层膜脂质相互作用则会破坏原本双层膜的有序排列,使其稳定性被破坏,而这和胆固醇与磷脂双分子层问的作用机理类似『质量浓度高于/时,醇质体易浑浊。为研究℃时质量浓度对醇质体的影响,制备了含不同质量浓度..醇质体。如图荆珻贾侍逶下外观变化明显,且粒径会随质量浓度增加而增加,与℃下的结果一致。对储存腃贾侍褰行黏度测量,结果表明醇质体的黏度随着质量浓度的增加而增加。这主要是层具有高表面黏度和高剪切模量,使其能够抵抗剪切变形俐。因此,在富含神经酰***的膜巾,其黏度会随增力口而增力口。将℃下储藏蠡胱堑腃贾侍逶下加热珻贾侍逵只嶂匦卤涞贸吻逋明。有研究表明圈,神经酰***具有长疏水链,极性极低,疏水性很强。醇质体中质量浓度较高时,由于其易通过自组装形成孤立的结晶相,神经酰***在液体介质7⑸亟峋Щ蛎飨缘木奂现象『珻贾侍迥嫌谥亟峋П涞没胱牵痹俅渭热,,。质量浓度对—醇质体的影响为了进一步探究修饰醇质体的性能,将作为脂溶性活性物载人醇质体,并考察了质量浓度对其粒径及℃下储藏稳定性的影响。冈表明随着质量浓度的增加,—醇质体的外观逐渐由淡黄色澄清透明液体变为黄色半透明液体;当质量浓度为蝝保>蹲钚∥±狢贾侍宓牧>端鍾柿浓度变化并不明显,当活性物深埋于疏水核心区/~℃下质量浓度对醇质体的外观、粒径、流变特性与加热水合特·眭的影响℃口巴世榛样品卜方标记数据为刘‘应的质量浓度,蝝质量浓度/痬加热图,,一,:南万方数据十冤讫时,对脂质双分子层的体积影响很小,即表现为粒径变化不明显『虼俗髡呷衔猂饕N挥谒ǚ子层的疏水核心区。⒉厥蔽试黾又鸾ケ得混浊,而其他质量浓度下醇质体的外观和粒径并未发生明显变化。当质量浓度为/时,粒径变化最小,储藏稳定性最好。这是因为当质量浓度为./时,被包载于脂质双分子层的疏水链之问,未对双分子层产生大的影响:而当质量浓度较大时,醇质体粒径会随储藏时间增加发生融合,从而使载体变得不稳定阎。—醇质体的湎哐苌浔碚为进一步研究在醇质体巾的状态,采用射线衍射对、醇质体和—醇质体进行了分析。在常温下通常以淡黄色结晶或液态形式存在,熔点在~℃。如图荆禾腞在.。出现非常强的单吸收峰,而醇质体和—醇质体巾,在.。的特征峰消失,这说明是以无定形状态存在。醇质体的全反射傅里叶红外光谱表征全反射傅里叶红外光谱可用来研究被包裹药物与脂质问的相互作,铡M为、空白醇质体、空白醇质体、醇质体和—醇质体的全反射傅里叶红外光谱图。存。κ茄羌谆一,一牟欢猿粕焖振动和对称伸缩振动,且强度较强:在一的两个吸收峰是酯基的和的伸缩振动,而一处则为烯烃侧链上的湫握穸6睾螅琑奶卣峰消失,说明被很好地包载于载体,这与前面的湎哐苌浣峁嘁恢隆通过对比发现,空白载体与包载药物载体峰形相似,说明药物与醇质体之问没有新的化学键生成。而空白醇质体、醇质体、空白醇质体和—醇质体在。浇汲鱿至饲课在‘和室温下质量浓度对——ⅰ纯品和—醇质体的湎哐苌渫计焕凇毒甑淼期样品上方标记数据为对应的质量浓度,蝝夤靼裂质最浓度/痬粒径图—。∞∞∞毯取莨靶量甇***農。猺譬矗万方数据——芸堕堕堡一—卜≮■————弋一,.奎鲤竺攫黔、、·/,\窒里望塑堡一主相变焓从./陆抵.±坛,———、望:里榍!峰,这是脂质载体所特有的峰【,通过对比空白醇质体与包载药物醇质体可以发现,药物会使载体的特征吸收峰向更低波数移动,。而对比醇质体和—醇质体可以发现,~醇质体在。Φ奈辗逑蚋低的波数移动。而分子含有羟基官能团、酰***键,能够形成广泛的氢键矧,说明脂质膜巾的能使醇质体的氢键作用增强。醇质体的治采用芯苛舜贾侍宓娜戎孪啾淝榭觥1为和醇质体的量热参数,图?瞻状贾侍濉⒖白醇质体、醇质体和—醇质体的摺通过对比空白醇质体和空白醇质体可以发现,醇质体的主相变温度南.±升至.±℃,主相变焓南././,这也与高温储存的稳定性结果相一致。而主相变半峰宽的值增大,说明醇质体的相变协同性随着的加入而降低,这是由于具有羟基官能团、酰***键,***的区域网,从而导致相变协同性的降低,结果说明可以使脂质膜产生分相现象,会出现富含的富集相和贫瘠相,已有研究表明和蓟嵊盏冀峁褂的产生俐,这对细胞膜或生物膜的生理特性具有重已有研究表明脂质体主相变的变化与其分子中碳氢链的变化有关,当外源性药物进入脂质体的疏水尾链区域后会引起主相变温度和主相变焓的降低嗍。当载人空白醇质体时,醇质体的主相变温度从.±。,说明与脂质膜的疏水链发生作用,为脂溶性物质,具有较长的脂肪烃侧链,且被包裹在脂质双分子层的疏水链之问,凶此会与疏水尾链产生相互作用,这与全反射傅里要意义。图┪镉朐靥宓娜ǚ瓷涓道镆逗焱夤馄淄空白醇质体醇质体醇质体—醇质体表和醇质体量热参数图贾侍宓腄曲线、醇质体主相变温度变化和醇质体主相变焓变化琺;‰波数/磬一.—...±’~刀。、\,。、:“万方数据通过考察质量浓度,得出最佳载药量为;参考文献:叶红外光谱结果一致。当载入空白醇质体时,—醇质体的主相变温度和主相变焓也都降低,这也符合外源性药物对脂质体的影响。载人药物会使主相变的半峰宽增加,降低醇质体脂质膜的相变协同性,而这也与前人的研究相一致『D弦陨螪数据可以得山,的加入可以提高空白醇质体和载药醇质体的相变温度,使其耐热性能变好,稳定性得到提高。—醇质体的体外释放曲线—醇质体在透析介质寤质乙醇溶液与中的体外释放呒。醇质体在前苯辛送皇停头怕试嘉ィ笔头怕蚀锏阶畲螅咏ァT~┪锏释放率接***缓,说明携带药物的醇质体囊泡易在体外模拟释放实验巾将药物释放出来,且未发生变质。作者将用来修饰醇质体以提高其稳定性,通过考察质量浓度对空白载体的影响,得出当质量浓度为/:通过湎哐苌浜腿ǚ瓷涓道镆逗焱夤馄追治觯明被很好地包载于载体中。治霰砻鳎珻的加入降低醇质体的流动性,从而提高其稳定性。通过对—醇质体的体外释放性能的探究,表明—醇质体具有较好的体外释放性能,这将有利于其在抗氧化领域的应用。神经酰***修饰醇质体将有利于克服易降解或易结晶析出活性物的实际应用难题,该载体良好的热稳定性也为食品加工提供了可能。瑆琇图贾侍逶赑械奶逋馐头徘印瓹,,耪穑乱环桑轮纹剑邹悸ù寄擅状贾侍逄逋饪寡趸饔玫难芯縖广东化工,:—.『.:.珹甁瓹:..言品澹盼懊簦痈窬0饭δ芎陀τ肹粮食与油脂,,,,:—.珹甁:.琖琫閏.:苫磊短О卧嫜П甑淼期鋠托.,琣:Ⅱ:￡琫戈賝,セ嗳鏾篴,,:珿現.,如,,琀.—瓻篴—衞琓.—琑::—.:射桂杰,梁蓉,,,『狝.¨,,:—.,,—瓹邱树虹,,,琒.,,:.瓼:.琄,竜甀珺,,—赵静,李螈,李开玲,:.—,:江南大学,.┲幸揭┐笱В鹑伪嗉菏啡蠖ǘ珻.:..***—騨:.琋.””:,琙:瑂遖,,—珻.::钞阳—,:..簆“琾珿狝,,瓹篴埘【,,:—.琂猠珹珿—,:.甊