鸟分枝杆菌副结核亚种的分子检测的制作方法.docx

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对,没有任何一种阴性对照产生了阳性结果。对从患有副结核性肠炎(Johne′sdisease)的牛上得到的10例FFPE样本用B1、B2、B3和B4方法处理所记载的阳性结果数目分别为6、9、6和10(表4)(图1)。被评估的所有PCR方法的敏感度都令人满意,尤其是使用巢式分析法。从细菌培养物里得到阳性结果所需的DNA的最低量为8pg(方法B4),这相当于大约1500个菌细胞(Baess等1984)。。更具体的是,发现方法B2和B3只有在联合使用时才可能涵盖诊断上的MAP全部范围,方法B1也存在类似的问题。方法B4对MAP的检测与所使用的材料无关。基于我们的试验数据,发现方法B4,即单管巢式PCR,它具有在相同的时间最高敏感度,特异性及再现性,同时在相同的时间它能在最短可能的时间内和最低必须的成本下直接检测结果。在从培养物中提取的细菌中,发现方法B1和B4