下载此文档

高荧光亮度的量子点复合颗粒和免疫学检测探针及复合颗粒的制备方法.docx


文档分类:论文 | 页数:约41页 举报非法文档有奖
1/41
下载提示
  • 1.该资料是网友上传的,本站提供全文预览,预览什么样,下载就什么样。
  • 2.下载该文档所得收入归上传者、原创者。
  • 3.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
1/41 下载此文档
文档列表 文档介绍
该【高荧光亮度的量子点复合颗粒和免疫学检测探针及复合颗粒的制备方法 】是由【开心果】上传分享,文档一共【41】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【高荧光亮度的量子点复合颗粒和免疫学检测探针及复合颗粒的制备方法 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。高荧光亮度的量子点复合颗粒和免疫学检测探针及复合颗粒的制备方法专利名称:高荧光亮度的量子点复合颗粒和免疫学检测探针及复合颗粒的制备方法技术领域:本发明涉及一种高荧光亮度的量子点复合颗粒及由该复合颗粒制成的免疫学检测探针,还涉及该复合颗粒的制备方法。背景技术:自从1998年有关量子点用于荧光探针的研究被美国《科学》杂志报道后,各国科学家开始关注发光量子点用于生物检测系统,尤其是用于示踪的各种荧光探针的研究;具有前瞻意义的是发光量子点用于免疫学检测,比如有人将量子点探针用于乳腺癌的临床检测,其方便快捷的方式为免疫学检测创造了一个可以利用的很好的平台。量子点用于免疫学检测的关键技术是制备有效的检测探针,免疫学检测过程中要求探针具有高发光亮度、高稳定性、高抗光漂白性,其目的是增加检测探针的检测灵敏度与准确度;虽然传统的有机发光分子也可作为荧光探针,但是其存在信号强度低、易光漂白、窄的激发谱和宽的发射谱等缺点,严重地制约了其在实际生产、生活中的应用。与有机发光分子相比,半导体量子点则表现出诸多方面的优势,成为制备有效检测探针的首选;然而由于量子点本身的化学、物理不稳定性,进而使其荧光传感性能非常易于受到测试环境的影响,从而很大程度上影响了对于待测物质检测响应的精确性与可重复性。发明内容本发明的一个目的是提供一种高荧光亮度的量子点复合颗粒,该复合颗粒在单个量子点或多个量子点表面包覆一层二氧化硅壳,使量子点稳定性增强。本发明的第二个目的是提供该复合颗粒的制备方法,通过该方法能够克服量子点的化学物理不稳定性、荧光传感性能易于受到检测环境影响的不足。本发明的第三个目的是提供一种由上述复合颗粒制成的高荧光亮度的免疫学检测探针,其具有很好的生物适应性及稳定性,使量子点在检测探针方面的应用更加具有优势。本发明具体技术方案如下一种高荧光亮度的量子点复合颗粒,其特征是在一个或多个量子点表面包覆上一层二氧化硅壳形成复合颗粒,所述复合颗粒直径为5100nm,其中SiO2与量子点的摩尔比为60--40。进一步的,上述量子点复合颗粒中,在二氧化硅壳表面修饰有官能团,所述官能团为氨基、巯基、羧基或聚乙二醇基(PEG)。上述量子点复合颗粒中,二氧化硅壳内分布有1200个量子点,量子点的粒径为115nm,量子点可以选自II-VI族半导体材料、III-V族半导体材料,也可以选自II-VI族半导体材料和III-V族半导体材料形成的复合材料,优选的量子点为SiSe、CdSe,CdS、CdTe>InP、ZnSe/ZnS、CdSe/ZnS、CdS/ZnS、CdTe/ZnS、InP/ZnS、CdSe/ZnSe、CdS/ZnSe、CdTe/ZnSe,CdSe/CdS、InP/CdS、CdTe/CdS、CdSZZnxCd1^S,ZnSeZZnxCd1^S,CdSeZZnxCd1^S,CdTe/ZnxCdhS、InP/ZrixCdhS、ZnSe/CdS/ZnS,CdSe/CdS/ZnS、CdTe/CdS/ZnS、hP/CdS/ZnS,可以选择它们中的一种或多种,其中02-[甲氧基(聚乙烯氧代)丙基]三甲氧基娃烧(英文命名为2-[methoxy(polyethyleneoxy)propyl]-trimethoxy-silane)>2-***-3-羟丙基***(硅氧烷与聚硅氧烷)(英文命名为2-[meth0Xy(polyethyleneoxy)propyIJheptamethyItrisiloxane)或CH3O(C2H4O)6_9C3H6Cl3Si(英文命名2-[methoxy(polyethyleneoxy)propyl]-trichlorosilane)ο这些试齐阿在市场上买到,。本发明的量子点复合颗粒可用于免疫学检测领域,制成探针,其高荧光亮度的免疫学检测探针组成是将高荧光亮度的量子点复合颗粒与生物分子连接形成探针,生物分子与二氧化硅壳表面修饰的官能团连接,所述生物分子为维生素、蛋白质分子、DNA或抗体分子,所述抗体分子可为完整的分子或者是重链、轻链、重链或轻链复合的抗体分子碎片。量子点复合颗粒与生物分子通过各种共价和非共价的方法进行连接,这些量子点与生物分子的连接技术已经相对成熟,本领域技术人员可以根据现有公开的方法将复合颗粒与生物分子进行连接,在此不再详述。本发明首先通过已经掌握的化学合成方法合成一系列发光量子点,然后将这些量子点通过自组装、溶胶-凝胶技术等技术引入到SiO2颗粒中,形成一种新的发光的复合颗粒。由于SiA材料本身具有很强的化学物理稳定性且无毒,若将半导体量子点包覆于SiA材料中,则S^2壳层可为量子点提供很好的生物适应性与环境稳定性,由于SiA表面官能团能使复合颗粒与生物分子良好结合,因此本发明检测探针具有高稳定性与高发光亮度,在医药、生物领域将会产生很高的应用价值,可用作普通荧光探针、免疫学检测剂及其它生物传感器。图1为含有单个量子点的SiO2颗粒的电镜照片,(a)为一个SiO2颗粒中含一个发绿色荧光CdTe量子点(b)为一个SiO2颗粒中含一个发红色荧光CdTe量子点。图2为含有多个量子点的SiO2颗粒的电镜照片,(a)为一个SiO2颗粒中含2_3个发红色荧光的CdTe量子点(b)为一个SiO2颗粒中含4-7个发红色荧光的CdTe量子点。图3为含有多个Cdk/ZnS量子点的S^2颗粒的电镜照片。。首先合成制备CdTe量子点所需的NaHTe将Te粉与NaBH4按照摩尔比15混合,加入一定量的水,氮气保护下60°C水浴加热并搅拌至溶液变为淡紫色。*,(TGA),搅拌,。将该溶液氮气除氧30分钟,然后注入上述制备的NaHTe溶液,100°,即得水溶性的发绿色光的CdTe量子点()。利用乙醇与异丙醇将量子点从溶液中沉淀、离心分离,并将得到的量子点分散到水中。,量子点的浓度为1X10—6M,加入巯丙基三甲氧基硅烷3μL,搅拌15小时,完成量子点的配体交换。,加入15%,搅拌5小时,完成量子点的自组装。,加入正硅酸乙酯16μL、30wt%,之后搅拌3小时,加入巯丙基三甲氧基硅烷1μL继续搅拌10小时,离心分离后得到中心均勻分布量子点且表面含有巯基的SiO2颗粒,电镜照片如图Ia所示;将这些S^2颗粒分散到1mL、浓度为IX的PBS缓冲液中备用。,搅拌、超声直至全部溶解。取上述100μιIgG溶液与40μ的3-sulfo-N-inimide(sulfo-)(4mM)偶联剂混合,室温下反应2-3h。将100PL上述巯基修饰的SiO2颗粒与上述偶联剂溶液混合,并放置在干浴中,4°C恒温保存Mh,然后用PBS缓冲液浓缩抽滤4次(采用5XIO5-MWCO的超滤离心浓缩管)。最终将表面修饰有IgG的SW2颗粒分散到磷酸盐浓度为10mM的PBS缓冲液中制得发绿色光的可用于免疫学检测的探针。。首先合成制备CdTe量子点所需的NaHTe将Te粉与NaBH4按照摩尔比15混合,加入一定量的水,氮气保护下60°C水浴加热并搅拌至溶液变为淡紫色。·,(TGA),搅拌,。将该溶液氮气除氧30分钟,然后注入上述制备的NaHTe溶液,100°C下加热回流Mh,即制得水溶性的发红色光的CdTe量子点(粒径为4nm)。利用乙醇与异丙醇将量子点从溶液中沉淀、离心分离,并将得到的量子点分散到水中。,量子点的浓度为1X10—6M,加入巯丙基三甲氧基硅烷5μL,搅拌10小时,完成量子点的配体交换。,加入6wt%,搅拌5小时,完成量子点的自组装。,加入正硅酸丁酯20μL、10%,之后搅拌3小时,加入羧乙基硅三醇钠盐(riolsodium)2yL继续搅拌ο小时,离心分离后得到中心均勻分布量子点且表面含有羧基的SW2颗粒,电镜照片如图Ib所示;将这些SW2颗粒分散到lmL、浓度为IX的PBS缓冲液中备用。,搅拌、超声直至全部溶解。取上述100μIgG溶液与100μ上述羧基修饰的SiO2颗粒混合,并放置在干浴中,4°C恒温保存10h,然后用PBS缓冲液浓缩抽滤4次(采用5XIO5-MWCO的超滤离心浓缩管)。最终将表面修饰有IgG的SW2颗粒分散到磷酸盐浓度为10mM的PBS缓冲液中制得可用于免疫学检测的探针。。。,,,搅拌5小时。,加入5wt%,搅拌15小时,完成量子点的自组装。,加入正硅酸丙酯16μL,10wt%,之后搅拌3小时,加入巯丙基三甲氧基硅烷1μL继续搅拌10小时,离心分离后得到中心均勻分布量子点且表面含有巯基的SiO2颗粒,电镜照片如图加所示;将这些S^2颗粒分散到lmL、浓度为IX的PBS缓冲液中。,搅拌、超声直至全部溶解。取上述100μιIgG溶液与40μ的3-sulfo-N-inimide(sulfo-)(4mM)偶联剂混合,室温下反应3h。将100PL上述巯基修饰的SiO2颗粒与上述偶联剂溶液混合,并放置在干浴中,4°C恒温保存Mh,然后用PBS缓冲液浓缩抽滤4次(采用5XIO5-MWCO的超滤离心浓缩管)。最终将表面修饰有IgG的SW2颗粒分散到磷酸盐浓度为10mM的PBS缓冲液中制得可用于免疫学检测的探针。。。,量子点的浓度为1X10_6M,,搅拌5小时。,加入33wt%,搅拌15小时,,加入正硅酸乙酯14yL,25wt%,之后搅拌3小时,加入巯丙基三甲氧基硅烷1μL继续搅拌10小时,离心分离后得到中心均勻分布量子点且表面含有巯基的SW2颗粒,电镜照片如图2b所示;将这些SW2颗粒分散到lmL、浓度为IX的PBS缓冲液中。(L)加入到2mLIX的PBS缓冲液中,搅拌、超声直至全部溶解。取上述50μIgG溶液与40μ的3-sulfo-N-inimide(sulfo-)(4mM)偶联剂混合,室温下反应3h。将100PL上述巯基修饰的SiO2颗粒与上述偶联剂溶液混合,并放置在干浴中,4°C恒温保存Mh,然后用PBS缓冲液浓缩抽滤4次(采用5XIO5-MWCO的超滤离心浓缩管)。最终将表面修饰有IgG的SW2颗粒分散到磷酸盐浓度为10mM的PBS缓冲液中制得可用于免疫学检测的探针。。。,量子点的浓度为1X10_5M,加入巯丙基三甲氧基硅烷1μL,搅拌5小时。,加入33wt%,搅拌M小时,,加入正硅酸乙酯1μL,33wt%,之后搅拌6小时,,继续搅拌1小时,离心分离后得到中心均勻分布量子点且表面含有氨基的SiO2颗粒;将这些氨基修饰的SiO2颗粒分散到lmL、浓度为IX的PBS缓冲液中。(H+L)加入到2mLIX的PBS缓冲液中,搅拌、超声直至全部溶解。取上述100μIgG溶液与100μ上述氨基修饰的SiO2颗粒溶液混合,并放置在干浴中,4°C恒温保存10h,然后用PBS缓冲液浓缩抽滤4次(采用5XIO5-MWCO的超滤离心浓缩管)。最终将表面修饰有IgG的SW2颗粒分散到磷酸盐浓度为10mM的PBS缓冲液中制得可用于免疫学检测的探针。(,46,2013-2019)将一定量的***镉Cd(NO3)2、巯基丙酸、Na2S分别溶于水中,在室温且磁力搅拌情况下,将***镉溶液加入到巯基丙酸水溶液中,向该混合液中加入氨水调节其PH值至10,继续搅拌,然后再向该混合液中迅速加入Na2S水溶液,最终得到微黄色的CdS量子点水溶液,量子点的平均直径为lnm。利用乙醇与异丙醇将量子点从溶液中沉淀、离心分离,并将得到的量子点分散到水中。,量子点的浓度为6X10_6M,,搅拌3小时。,加入10衬%,搅拌15小时,完成量子点的自组装。,加入正硅酸乙酯8μL,15wt%氨水ImL,之后搅拌5小时,加入PEG基硅烷2-[methoxy(polyethyleneoxy)propyl]-trimethoxy-silane1μL以及巯丙基三甲氧基硅烷1μL,继续搅拌5小时,离心分离后得到中心均勻分布量子点且表面含PEG基及巯基的SiO2颗粒;一个SiO2颗粒中含有约200个量子点,将这些S^2颗粒分散到lmL、浓度为IX的PBS缓冲液中备用。(H)加入到2mLIX的PBS缓冲液中,搅拌、超声直至全部溶解。取上述

高荧光亮度的量子点复合颗粒和免疫学检测探针及复合颗粒的制备方法 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.

相关文档 更多>>
非法内容举报中心
文档信息
  • 页数41
  • 收藏数0 收藏
  • 顶次数0
  • 上传人开心果
  • 文件大小46 KB
  • 时间2024-04-13