长链扣手探针的生物合成方法.docx

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%(质量百分含量)尿素变性聚丙烯酰***凝胶;步骤C)中,所述反向层析中采用如下溶液进行洗脱将30ml己***和70ml去离子水混合得到的溶液;所述反向层析中采用的层析柱为Sep_PakC18柱。-3任一所述的方法制备得到的扣手探针。-3任一所述的方法在合成5’端磷酸化的长寡聚核苷酸中的应用,所述长寡聚核苷酸为大于IOOnt的寡聚核苷酸。,从5’至3’依次为与待测基因5’端互补的左侧寡核苷酸、探针主体片段和与待测基因3’端互补的右侧寡核苷酸;所述探针主体片段为序列表中序列I自5’末端的第24-125位寡核苷酸或序列表中序列2自5’末端的第24-125位寡核苷酸。,其特征在于所述与待测基因5’端互补的左侧寡核苷酸为序列表中序列I自5’末端的第1-23位寡核苷酸或序列2自5’末端的第1-23位寡核苷酸;所述与待测基因3’端互补的右侧寡核苷酸为序列表中序列I自5’末端的第126-146位寡核苷酸或序列表中序列2自5’末端的第126-146位寡核苷酸;所述扣手探针的5’末端磷酸化,具体为所述左侧寡核苷酸自5’末端起第一位核苷酸的第5位C上连接磷酸基团。;或含有权利要求4或6所述扣手探针及其互补链的重组载体或重组菌,所述重组载体为将所述扣手探针及其互补链插入到POCP的