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实验室各种染料配比.docx


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】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制一、生物标本常用染料性能简介(一)天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用***浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优秀材料,他能把细胞中不同的构造分化出各样不同的颜色。分化时组织所染的颜色因办理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾办理,除掉其中杂质,就制成洋红。纯真的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。洋红使细胞核的优秀染料,染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现污浊时要过滤后再用。(二)人工染料人工染料,即苯***染料或煤焦油染料,种类好多,应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色,苯***蓝、亮绿、***绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度,并防止日光直射,也能经几年不褪色。1、酸性品红酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(%)。他是优秀的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟***绿同染,能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过分,易在自来水中褪色。2、刚果红刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。他能作染料,也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时,能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红能够跟苏木静作二重染色,也可用作类淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗涤和脱水处理要快速。3、***蓝***蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。***蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。***蓝极易氧化,因此用他染色后不能长久保留。4、固绿固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为4%)和酒精(溶解度为9%)。固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。5、苏丹Ⅲ苏丹Ⅲ是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为%)。苏丹Ⅲ是脂肪染色剂。6、伊红这类染料种类好多。常用的伊红Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15摄氏度是溶解度达44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为2%)。伊红在动物制片中宽泛应用,是很好的细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂。7、碱性品(复)红碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学制片中,长用来鉴识结核杆菌。在尔根氏反响中用作组织化学试剂,已核查脱氧核糖核酸。8、结晶紫结晶紫是碱性染料,能溶于水(溶解度9%)和酒精(%)。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优秀的染色剂。他是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能获得优秀的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显示细胞分裂的优秀染色剂。用结晶紫染纤毛,效果也很好。用结晶紫染色的切片,缺点是不易长久保留。9、龙胆紫龙胆紫是混淆的碱性染料,主假如结晶紫和***紫的混淆物。在必假如,龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫药水,主要成分是***紫,需要时能代替龙胆紫和结晶紫。10、中性红中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度4%)和酒精(%)。它的碱性溶液中体现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做活体染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。11、番红番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管制植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。12、亚甲蓝或美蓝亚甲蓝或美蓝是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水(溶解度%)和酒精(溶解度6%)。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料,其优点是染色不会过深。13、***绿***绿是碱性染料。它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。***绿是最有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一同可作植物木质部的染色。二、常用药品试剂和培养基的配制(一)反响剂1、检查葡萄糖试剂配方一本尼迪克(Benedict)溶液在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克无水碳酸钠。(2)在50毫升加热的蒸馏水中溶解。把硫酸铜溶液慢慢倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生积淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长久使用(寄存时间较久而产生积淀是,取上层清液使用,不必从头配制)。本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,~%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜积淀物。配方二裴林(Fehling)溶液(1)。(2)把125克氢氧化钾(钠)和173克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。上述两种溶液应分别保留。在检测葡萄糖时,使他们等量的混淆,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜积淀物。2、检查淀粉的试剂鲁哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)取6克碘化钾溶于20毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸馏水,贮存在棕色试剂瓶内。碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,比如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。3、检查蛋白质的试剂配方一米伦(Millon)试剂在60毫升浓***()中溶解40克***(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长久保留。在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。配方二双缩尿试剂分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液。在3毫升待测物中加入1毫升10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反响。4、检查脂肪的试剂苏丹Ⅲ(Ⅳ)Ⅲ(或苏丹Ⅳ),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保留备用。5、酸碱指示剂配方一酚酞试剂和试纸酚酞试剂取1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保留。酚态试纸取1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸馏水。把绿纸条放入酚酞溶液中浸润后,取出,放在无氨气影响处晾干。酚泰试剂(试纸)~10,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。配方二红蓝石蕊试纸取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分红两份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另1份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸润滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。6、检查二氧化碳的试剂检查二氧化碳的试剂,可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。,溶解在100毫升蒸馏水里,%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。(黄)~(蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。配方二石灰水在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保留。如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变污浊。7、检查细胞生活力的试剂检查细胞有无生活力,可用中性红***蓝试剂。配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和1%***蓝溶液,这两种溶液各取份混淆,用来判定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。(二)分别液1、肌细胞分别液配方一马克凯郎(allum)液取1份浓***、2份甘油、3份水,混淆后就获得马克凯郎液。把新鲜的肌肉组织小块(横纹肌、心肌和平滑肌)投入这种溶液里浸渍,分别时间需1~3日。这种溶液尤其适于分别横纹肌核心肌细胞。配方二氢氧化钾溶液取35克氢氧化钾,放在100毫升蒸馏水中,加热,使它完全溶解后,在室温下冷却。把新鲜的肌肉组织块投入氢氧化钾溶液中,浸泡15~30分钟后,肌细胞便可分别。2、上皮细胞分别液配方一福尔马林—******化钠,用蒸馏水溶解,再稀释到1000毫升,加入2毫升福尔马林。这种溶液是很好的上皮细胞分别液,分别很快速,而且能保护纤细的上皮细胞纤毛。小肠随和管的上皮组织小块,放在此溶液里2小时即可分别,口腔和皮肤上皮组织小块的细胞分别一般需3日左右。配方二水和***醛溶液称取5克水和***醛,用蒸馏水溶解,再稀释到100毫升,就获得5%水合***醛溶液。从洗净的动物胃、肠和口腔内壁上取下上皮组织一小块,投入以上溶液中,浸泡24~48小时。3、神经细胞分别液配方一能够用上皮细胞分别液配方一福尔马林—***化钠溶液来分别神经细胞(见2)。配方二硼酸生理盐水溶液1在生理盐水溶液内加入一些硼酸,搅拌到不再溶解时为止,使成为饱和溶液。把脊椎灰质和脑皮质部位的神经组织一小块投入这种溶液中分别。4、植物茎细胞分别液杰弗里氏(Jeffrey’s)液取等量的10%铬酸溶液和10%***溶液混淆,成铬酸—***溶液。这种溶液用来分别木本植物茎部的导管、管胞、筛管、伴胞和韧皮纤维等。把材料切成小块放在水里,加热煮沸,冷却后再加热煮沸。这样重复几次,到材料全部沉于水底后,投入分别液内,分别时间是24~48小时。5、植物根尖细胞分别液配方一盐酸—酒精溶液在1份95%酒精中慢慢的加入1份浓盐酸,即成盐酸—酒精溶液,装瓶密闭保留。把植物根尖部位截下一小段,投入以上溶液中分别。配方二4%盐酸溶液配制4%盐酸溶液。截下植物根尖部位,投入盛有4%盐酸溶液的小烧杯内,在60摄氏度温水中隔水温热1~2分钟,使根尖软而不酥,这时分别效果最好。6、植物纤维分别液取10克氢氧化钠(或氢氧化钾),溶解在90毫升水里,制成10%氢氧化钠(或氢氧化钾)溶液,放在瓶里密闭保留。把植物茎纵切成细条,剪成小段后,投入分别液内。7、植物细胞质壁分别液配方一30%蔗糖溶液取30克蔗糖,溶解在70毫升蒸馏水里,装瓶备用。配方二5%***化钠溶液取5克食盐,溶解在95毫升蒸馏水里,装瓶备用。配方三5%***钾溶液取5克***钾,溶解在95毫升蒸馏水里,装瓶备用。(三)%。***化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释到100毫升。%。***化钠,溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。%。***化钠,溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。配方二任氏(Ringer’s)生理盐水************化钠、***化钾、碳酸氢钠、磷酸二氢钠分别溶解在少量蒸馏水中,混淆后用蒸馏水稀释到980毫升。然后取***化钙溶解在20毫升蒸馏水中,把***化钙溶液逐滴加入到上述溶液内,边滴、边搅拌,免得产生不溶解的磷酸钙积淀。此溶液用于变温动物,尤其常用于两栖类。配方三乐氏(Locke’s)生理盐水***~*********化钠、***化钾、碳酸氢钠分别用少量蒸馏水溶解,混淆后加蒸馏水到980毫升。把***化钙溶解在入上述溶液中。以上溶液用于恒温动物,尤其常用于哺乳类。(四)培养液1、人造海水20毫升蒸馏水里,逐滴加配方一************,再加入碳酸氢钠,最后用蒸馏水稀释到1000毫升。配方二*********化铁(1%溶液)1滴、磷酸一氢钾、***化铁用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到980毫升。随后取***钙溶解在20毫升蒸馏水里,把此溶液逐滴加到上述溶液内,装瓶保留。配方二克诺普氏(Knop’s)溶液***钾1克硫酸镁1克磷酸二氢钾1克***钙3克先把***钾、硫酸镁、磷酸二氢钾用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到980毫升。随后取***钙,用20毫升蒸馏水溶解,加入到上述溶液内。溶液灰形成白色积淀,在使用是必须摇动。在以上溶液中加入蔗糖溶液(1~4%),能刺激某些藻类形成游动孢子。该液用于培养绿藻。3、植物无土培养液配方霍格伦德(Hoagland)和斯纳德(Snyder)液******,然后稀释到1000毫升。(五)培养基1、***,放入牛肉膏、蛋白胨和***化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌免得粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%~,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。配方二马铃薯培养基取新鲜牛心(除掉脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。过滤,滤出的肉末干燥办理,。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。()%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基(高氏培养基)可溶性淀粉2克******,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。~,分装后灭菌,备用。配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升把面粉用水调成糊状,加水到500毫升,放在文火上煮30分钟。另取500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,,分装,灭菌,备用。3、真菌培养基配方一萨市(Sabouraud’s)培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。本培养菌是培养很多种类真菌所常用的。配方二马铃薯糖琼脂培养基把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分。在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。~,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升洗净黄豆芽,加水煮沸30分钟。用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补足水分到1000毫升,分装,灭菌,备用。~,可用来培养细菌和放线菌。配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取80粒干豌豆加水,煮沸1小时,用纱布过滤后,在滤液中加入琼脂,煮沸到溶解,分装,灭菌,备用。4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克把马铃薯洗净去皮后,切成小块。称取马铃薯小块200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后,过滤。在滤汁中补足水分到1000毫升,即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用。使用该培养基对pH值要求不严格,能够不测定。配方二综合马铃薯培养基20%%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各样组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。分装,灭菌,备用。该培养基用于培养和保留灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。(六)染色剂1、细菌染色剂配方一齐氏(Ziehl)石炭酸品红染液甲液取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。,放入研钵中研磨,渐渐加入10毫升95%酒精,持续吞没,使它溶解。将甲液和乙液混淆后,摇匀,过滤,装瓶,备用。配方二罗氏(Loeffler’s)美蓝染液甲液取5克美蓝,溶于100毫升95%酒精中,制成美蓝—酒精饱和液。(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,%浓度可用于酵母菌染色。配方三革兰氏(Gram’s)染液用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液办理,最后用丁液复染。四种液体的配方如下:甲液(结晶紫液)(1)结晶紫2克95%酒精20毫升(2)(1)、(2)液相混,静置48小时后使用。乙液(碘液)

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