微生物的分布实验报告.pdf

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伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、,包括原核类、真核类和非细胞类。原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类:真菌、原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、:圆形、芽生孢子。如:酵母菌多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。如:(白念)生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、S感染微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生:..让每个人平等地提升自我孢子、:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜(比菌体大1-3倍)致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;S——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个四、)球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌(子弹形)、脑膜炎双:..让每个人平等地提升自我球菌(蚕豆形)、四联菌2)杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌(异染颗粒)、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3)螺形菌弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、(ocus);肺炎双球菌(pneumous);脑膜炎球菌(us);破伤风杆菌(ClostridiumTantenus);霍乱弧菌(vibriocholera);芽胞(spore);鞭毛(flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图,已交。:..让每个人平等地提升自我六、(1)未滴加镜油(2)镜头不干净(3)标本放置反了,所以达不到对焦平面(4)制片问题:标本太厚、染色误差等细菌分布一、、培养、、::水、碳源、氮源、::..让每个人平等地提升自我(1)根据营养物质:营养培养基、选择培养基、鉴别培养基(2)根据物理性质:液体培养基、:表面生长、均匀浑浊生长、:革兰阳性细菌细胞壁的肽聚糖(peptidoglycan)层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,通道弯曲,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后孔径仍可使结晶紫与碘的复合物通过,因而将染料洗去而被脱色。三、实验材料咽拭子、羊血培养皿:1套/人;大号普通培养皿:1块/2人;载玻片:1片/人;A、B菌:6套/桌;NS:1份/人;滤纸:1张/人;消毒液:4套/桌;三角瓶、电天平、营养琼脂、称药纸、称药勺、量筒:1套/桌四、:..让每个人平等地提升自我1)按产品要求称取营养琼脂2)每实验桌制备200ml3)高压蒸汽灭菌后,在洁净工作台内倒平皿4)、培养1)咽部正常菌群的采样、培养咽拭子擦拭咽部,平行划线法接种于羊血平皿。2)手指消毒前后细菌的采样培养未消毒手指平行划线法接种于普通平皿;同一手指碘酒、酒精消毒后平行划线法接种于普通平皿。)空气培养将培养皿打开暴露于空气中,20分钟后盖好平皿盖儿2)流通纸币(或硬币)的细菌采样培养将硬币正反面分别在培养基上充分接触3)采样结束后,将培养皿底部朝上放入铁丝筐,统一置培养箱:37℃18-24小时:..、B、C菌鉴定(革兰氏染色法)1).细菌涂片制备程序:(1)取一干净玻片,火焰上方缓缓通过三次去油(2)蜡笔画线将玻片分割为A、B、C三区域(3)接种环取生理盐水分别滴入A、B两区域各一滴(4)分别取少许A、B、C菌,与生理盐水充分混匀成菌液,风干后形成菌膜(5)固定(火焰上方缓缓通过三次)(6)革兰氏染色(7)滤纸吸干水分,油镜观察2).革兰氏染色:(1)细菌涂片、火焰固定(2)结晶紫初染1min(3)卢戈氏碘液媒染1min(4)95%乙醇脱色30-40s(5)沙黄复染1min五、实验结果:..让每个人平等地提升自我A:G+,球菌,推测为金黄色葡萄球菌;B:G-,短杆菌,推测为大肠杆菌;六、:(1)细菌本身因素:菌龄:如果菌龄太大,可能出现假阴性(2)操作因素涂片:取菌应适量,涂片要均匀,如果某个部分菌层太厚,可能在脱色时达不到,会导致局部假阳性固定:固定温度太高或时间太长都会导致细菌结构破坏而出现假阴性;但是固定不够,细菌会在水洗时被冲掉初染:初染时间虽然说是1分钟,但是可以适当延长,时间太短会出现假阴性;染色滴加不均匀可能出现半阴半阳媒染:和初染一样脱色:脱色时间不能过长,基本上用酒精滴过之后马上水冲就可以了,否则容易出现假阴性复染:复染时间需足够长,否则可能会染不上