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异常凝血酶DCP单克隆抗体的制备及鉴定的中期报告.docx
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异常凝血酶DCP单克隆抗体的制备及鉴定的中期报告.docx
该【异常凝血酶DCP单克隆抗体的制备及鉴定的中期报告 】是由【niuwk】上传分享,文档一共【2】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【异常凝血酶DCP单克隆抗体的制备及鉴定的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。异常凝血酶DCP单克隆抗体的制备及鉴定的中期报告一、背景凝血酶是血液凝固过程中的关键酶之一,它的活性可通过凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)等检测方法进行定量测定。异常凝血酶活性可能导致出血或栓塞等疾病。因此,凝血酶在临床诊断和治疗中具有重要意义。DCP(Domainofunknownfunction,ConA-likeprotein,andPentaxin)是一类高度保守的Ca2+结合蛋白,已在多种哺乳动物中鉴定并广泛研究。研究表明DCP蛋白与血液凝血、炎症反应等生理过程密切相关。然而,目前缺乏对DCP在凝血酶活性中的作用的深入研究,并且缺乏特异性和高亲和力的单克隆抗体用于DCP的检测及功能研究。因此,本研究旨在制备和鉴定特异性的抗凝血酶DCP单克隆抗体。二、-DCP进行pET28a系统的蛋白表达。重组蛋白经His标签亲和柱纯化并鉴定纯度。,采用脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0的融合方法制备杂交瘤细胞。,筛选出单抗克隆。通过酶联免疫吸附实验和Westernblot分析确认抗体的特异性。三、+-NTA亲和柱纯化后,SDS-PAGE和Westernblot分析结果显示,单一条离子交换层析后分子量约为18kDa,Purity>90%。。Westernblot分析显示该抗体对DCP进行特异性识别,抗体与DCP呈现明显的结合反应。四、讨论本实验成功地制备并鉴定出特异性的抗凝血酶DCP的单克隆抗体,为后续DCP蛋白在凝血酶活性中的作用研究提供了基础。此外,由于DCP在炎症反应中也发挥重要的作用,本研究所制备的单克隆抗体还可用于其他与DCP相关的研究。
异常凝血酶DCP单克隆抗体的制备及鉴定的中期报告 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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