透射电子显微镜.ppt

透射电子显微镜
(Transmission Electron Microscope TEM)

TEM具有和光镜相似的结构系统,由电子枪产生的电子射线作为光源,由电磁透镜代替光镜中用玻璃制成的聚光镜、物镜和目镜

TEM 镜体结构相当复杂,镜筒内部要求高真空状态
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第一节透射电镜结构和工作原理

一、透射电镜结构
二、透射电镜工作原理★
第二节透射电镜样品制备技术

一、超薄切片技术★
二、特殊组织样品制备
第一节透射电镜的结构和工作原理
照明系统:电子枪、会聚透镜
镜筒{成像系统:样品室、物镜、中间镜、投影镜
观察记录系统:观察室、底片室
真空系统:机械泵、油扩散泵、真空管等
辅助{电源系统:高压电源、透镜电源、调压器等
水冷系统:循环水泵等
一、透射电镜的基本结构
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(一)电子束与电磁透镜

&电子束在真空中运动的速度与加速电压有关(阳极)加速电压越高,电子束的波长越短(根据光学阿贝公式原理,一台仪器的成像最高分辨率,约为它使用信息传递媒介波长的一半。电镜之所以能获得很高的成像分辨率,是由于它的电子束波长远较可见光的波长为短)
& 电磁透镜的焦距与磁场(线圈组成,当电流通过时产生磁场)强度有关,磁场越强,焦距越短,放大倍率越高
二、透射电镜的工作原理
(二)电镜图像形成
任何物质都是由原子组成的,
当均匀的电子束穿过样品时会受到
样品上信息的处理多数电子可从原
子和原子之间的空隙穿过,极少部
分电子与原子核和轨道电子发生碰
撞而形成散射电子
散射电子能力强的地方透过电子数目少
打在荧光屏上所发出的光弱,显现为暗区

散射电子能力弱的地方透过电子数目多
打在荧光屏上所发出的光强显现为亮区
样品结构不同散射电子的能力不同,结果?
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第二节透射电镜样品制备技术

一、常规样品制备技术

超薄切片技术※
负染技术

二、特殊样品制备技术

电镜酶细胞化学技术
免疫电镜技术
电镜原位杂交技术等
普通光镜切片厚度约5µm左右—石蜡切片
透射电镜切片厚度在50nm左右—超薄切片
(100nm以下)

目前有关生物体的各种组织、细胞的形态结
构知识大部分是超薄切片技术所提供
一、超薄切片制备技术
取材预固定后固定
脱水浸透包埋
修块切片染色
超薄切片技术的基本操作程序
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快尽量保持其生活状态,在1分钟内固定

小 1mm³的小块

轻不要牵拉、锯、挤压组织

冷 4℃保存
(一)取材