第二军医大学附属长征医院心内科
Epinephrine impairs Human Monocyte-Derived Dendritic Cell Migration and its Mechanism
儿茶酚***调节人单核细胞来源
树突状细胞迁移功能及其机制研究
梁春吴宗贵
1
DCs外向迁移与AS退化
DCs外向迁移与AS退化
DCs
外向迁移
AS
发生发展
受阻
恢复
AS
斑块退化
?
慢性应激是AS的独立危险因素
DCs表面存在多种βAR
研究目的和意义
体外观察儿茶酚***是否影响人DCs迁移功能
和CCR7表达,并探讨其机制。
为慢性应激在AS发病中的作用机制研究
提供新理论。
主要研究内容
Ⅱ儿茶酚***(肾上腺素和去甲肾上腺素)
R7表达的影响
Ⅲ肾上腺素对DCs迁移能力
影响机制的研究
Ⅰ***外周血DCs的
分离培养和诱导分化
DC培养流程
浓缩白细胞
密度梯度离心法
单个核细胞层
CD14+
磁珠分选法
单核细胞
LPS
200ng/ml
IL-4 20ng/ml、GM-CSF 50ng/ml
培养第6天
流式鉴定
培养第8天
流式鉴定
DCs鉴定—表面成熟标记流式检测
R7表达的影响
DCs
分为6组
空白对照
共同孵育 24 小时
LPS
LPS
EPI 10-7M
EPI 10-5M
LPS
EPI 10-6M
LPS
EPI 10-5M
流式检测DCs成熟标记
Transwell检测DCs迁移能力
R7表达
ELISA检测IL10的分泌
肾上腺素β1 β2 α受体的作用
DCs
分为8组
LPS
LPS
EPI
Transwell检测DCs迁移能力
R7
空白对照
LPS
EPI
metopro
LPS
EPI
ICI118
LPS
EPI
Proprano
LPS
EPI
phento
LPS
EPI
Propran + phento
共同孵育 24 小时
肾上腺素对DCs迁移能力的影响
*p> ; † p< vs. LPS
*
†
†
†
迁移到下室的细胞数
迁移到下室的细胞数
迁移指数Chemotaxis index =
rhMIP-3β 200ng/ml
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