邻二氮菲分光光度法测定微量铁.doc

实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件
一、实验目的
1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。
2、学****分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。
二、实验原理
在可见光区分光光度法测量中,通常是将被测物质与显色剂反应,使之生成有色物质,然后测其吸光度,进而求得被测物质的含量。显色反应的程度受显色剂用量、显色时间,显色液酸度等条件的影响,通过实验,确定合适的显色条件。
三、仪器及试剂
分光光度计;1cm吸收池;10mL移液管; 25mL容量瓶,100ml容量瓶

100μg·mL-1( mg·mL-1)铁标准溶液:(NH4)2 Fe(SO4)2·6H2O于烧杯中,用2 mol·L-l盐酸15 mL溶解,移入500 mL容量瓶中,以水稀释至刻度,摇匀。
用前,准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液。
2. -1邻二氮菲: g邻二氮菲于小烧杯中,加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解,再用水稀释到1000 mL。
3. 10%盐酸羟***水溶液:10%水溶液(现用现配,避光保存)
4. 醋酸钠溶液 1mol/L
5. mol/L氢氧化钠溶液
四、实验步骤
1、吸收曲线的制作和测量波长的选择
、 10 ug·mL-1标准溶液,分别注入二个25 mL容量瓶中,%的盐酸羟***溶液,摇匀后放置2 min;再加2 mL邻二氮菲溶液,,用水稀释至刻度,摇匀。放置5min后,用1cm比色皿,以试剂空白为参比,在440~560nm之间,每隔10nm测一次吸光度,其中在500-520 nm之间,每隔5nm测一次吸光度。然后以波长为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制吸收曲线,找出最大吸收波长。
2、显色剂用量影响
在7只25mL容量瓶中, mL10 ug·mL- mL 盐酸羟***溶液,摇匀后放置2 min。、、、、、 、 -1邻二氮菲溶液, 1mol/L醋酸钠缓冲溶液,以水稀释至刻度,摇匀。放置5min后,以水为参比,在510 nm测量各溶液的吸光度。
其中, mL -1邻二氮菲溶液的显色溶液不要倒掉,用于时间影响的测定。
3、显示时间的影响
mL -1邻二氮菲溶液的容量瓶,在显色时间为10min、20min、30min、40min、50min、60min分别测定吸光度值。
4、溶液酸度的影响
在7只25mL容量瓶中, mL 10 ug·mL- mL 盐酸羟***溶液,摇匀后放置2 min,,摇匀。然后, mol·L-、、,,,、,以水稀释至刻度,摇匀
,放置10min。
用精密pH试纸测定上述溶液pH值,同时在分光光度计上,波长为510 nm,以水为参比测定各溶液的吸光度。
五、数据记录

波长nm
440
450
460
470
480
490
500
505
510
515
520
530
540
550
560
吸光度A
2、显色剂用量的影响
显色剂用量ml







吸光度A
3、显色时间的影响
显色时间min
10
20
30
40
50
60
吸光度A
4、溶液酸度的影响
溶液pH
吸光度A
六、结果讨论与思考
1. 分别以波长、显色剂体积、显色时间、溶液pH为横坐标、相应的吸光度为纵坐标,绘制曲线,确定最大吸收波长、合适的显色剂用量、显色时间、溶液pH是多少?
,用手拿比色皿时应注意什么?
实验二邻二氮菲分光光度法测定微量铁的浓度
一、实验目的

、性能及使用方法
二、实验原理
邻二氮菲(又称邻菲罗啉)是测定微量铁的较好试剂,在pH=2~9的条件下,二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的=,摩尔吸光系数=11000 L·mol-1·cm-1。
在显色前,用盐酸羟***把三价铁离子还原为二价铁离子。
4Fe3++2NH2OH→4Fe2+ + N2O + 4H++ H2O
测定时,控制溶液pH=5较为适宜,酸度高时,反应进行较慢,酸度太低,则二价铁离子