糖化血红蛋白的测定.doc

糖化血红蛋白的不同检测方法及公认的金标准方法
目前,糖化血红蛋白HbA1c作为糖尿病筛选、诊断、血糖控制、疗效考核的有效检测指标,在临床中得到了广泛的使用,其理由有二个:目前HPLC法测定HbA1c使其准确性和重复性得到很大的提高。美国临床化学协()HbA1C标准化工作组建议,T研究中所“指定的方法”-HPLC方法作为检测糖化血红蛋白的金标准,希望以此使大多数的实验方法能够参照“指定的方法”实现标准化。1993年美国1型糖尿病控制及并发症实验(DCCT)和英国大规模的2型糖尿病控制与并发症关系研究(UKPDS)的研究中把HbA1c作为糖尿病控制的一个观察指标。1996年4月起在日本,HbA1c被纳入老年人保健法中糖尿病筛选的检查项目。2002年美国糖尿病协会(ADA)已将其作为监测糖尿病控制的金标准,对其应用也作了明确的规定:即所有糖尿病患者均应常规测定HbA1c。其初诊时测定结果为基线时的代谢状况,此后的测定值则作为糖尿病长期治疗控制中的一部分,这样在提高糖尿病诊断水平、血糖控制、慢性并发症的防治中具有十分重要的应用价值。
目前通常认为检测HbA1c的临床意义有三点:
在糖尿病的筛选普查中有早期提示的价值,可作为轻症、2型、“隐性”糖尿病的早期诊断指标。
,HbA1C是评价血糖控制好坏的重要标准。
、小血管并发症,估价糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。糖化血红蛋白的几种不同检测方法测定GHb主要是利用GHb和Hb的物理化学性质的不同而进行的,目前主要的检测方法有5种:离子交换高效液相色谱分析法-检测糖化血红蛋白HbA1c的金标准基于Hbb链N末端缬氨酸糖化后所带电荷不同而建立。在中性pH条件下,HbA1c携带的正电荷相对较少,因此可通过HPLC法将其与其它组分(HbA1c,HbA1b,HbA1a,HbF,HbA0)区分开,得到分离。T的研究,是目前检测HbA1c的金标准。(2)微柱法微柱内的阳离子交换树脂(如Biorex70)在PH近7时解离后带阴电荷,而Hb解离后带阳电荷,二者可形成离子键。由于GHb的阳电荷比HbA少,与树脂的结合力相对低,容易被洗脱。用分光光度计分别测定洗脱液中GHb和溶血物中总Hb的吸光率(A),可计算出GHb占总Hb的百分比(%)。
但此方法的影响影响因素比较多:


,也会与糖化血红蛋白同时洗脱,从而使结果产生偏差(3)电泳法胶体颗粒在一定条件下可以带有电荷,带有电荷的胶体颗粒可以借静电吸引力在电场中泳行,带正电荷者泳向负极,带负电荷者泳向正极,此种现象称为电泳。血清中各种蛋白质都有它特有的等电点,各种蛋白质在各自的等电点时呈中性状态,它的分子所带正电荷与所带负电荷量相等。
但此方法学的弱点是:
,速度比较慢,无法进行实时检测。
,急诊插入、自动维护等功能比较欠缺。(4)亲和层析法利用生物高分子能与相应的专一配基分子可逆结合的原理将配基通过共价键牢固地结合于固相载体上制得亲和吸附系统。带有杂质的高分子分离目的物在一定条件下,能以某种次级键与已固相化的配基结合,而杂质则不吸附,除去杂质后变换条件,又可以使待分离的高分子