[硕士论文]NUP98相关融合基因致白血病机制的初步研究.pdf

上海第二医科大学
硕士学位论文
NUP98相关融合基因致白血病机制的初步研究
姓名:谢志尧
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:陈竺
20050501
明曼作者签名:。学位论文作者签名:谢意之学位论文使用授权声明学位论文独创性声明‘‘M∫荤硪恢本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除文中已绎沣明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。文中作了明确说明并表示谢意。而一粃艿有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查导师签名:日期日期:
——』频某醪窖芯中文摘要白血病是血液系统的一种恶性肿瘤,它的一个重要特征是在患者白血病细异的细胞遗传学异常存在着紧密的联系,其中以染色体易位破坏正常的基因结构并形成融合基因最为多见。这些融合基因编码蛋白以“显性负”或其他方式干扰造廊干、祖细胞的功能、代谢、信号转导及增殖、凋亡和分化等基本生命过程,最终导致细胞发生恶性转化。寻找特征性染色体异常,克隆受累基因,外,其余异常均累及位于腘基因。喙氐娜色体易位具有这样的特征:由于报道的临床病例较少,故属于较罕见型染色体胞中常出现克隆性基因数目或结构的异常。某些特定类型的白血病常与一些特并进一步研究这些基因的功能及其与肿瘤发生、发展的关系,对理解肿瘤的发病机制,寻找有效的诊断标志和治疗方法都具有熏要意义。染色体异常的检测己成为指导恶性血液疾病诊断、治疗及判断预后的重要手段之一。近年来,与染色体蛞斐L乇鹗怯牒丝椎鞍譔有关的染色体易位,报道逐渐增多,并引起了研究者们的关注。到目前为止,已有个相关的染色体易位或其它结构异常报道,其中除;籷易位;此外,喙氐娜旧逡孜簧婕暗陌籽2±嘈徒隙啵杉谠⒑治疗相关的急性髓性白血病⒐撬柙錾斐、【!盜。尽管累及娜旧逡孜籰临床病例报道不断增多,但喙厝诤匣虻功能及潜在致白血病机制研究并没有取得很大的突破,这也使喙厝诤基因成为当前白血病研究的难点与热点之一。本文中,我们在克隆甆融合基因的基础上,对其功能进行了初步的研究;此外,为探讨整体动物水平喙厝诤匣蚩赡艿闹掳籽2』制,我们建立了瓾淖;蛐∈竽P汀首先,我们在一例急性髓细胞性白血病患者中,通过定位侯选基因策略,一
=峁允荆由于缶床上累及娜旧逡孜徊±趾奔壹膊〉纳⒎⑿允共患者细胞遗传学上表现为号染色体三倍体;同时,湃旧宓膓、处分别发生断裂,倒位后易位到号染色体纬裳苌湃旧澹号染色体肆2糠钟⑸诤希纬裳苌号染色体:至端粒间的染色体片断发生缺失。分子水平上,虻磐庀杂栌隢基因的号外显子相融合,形成嵌合甆转录本,编码蛋白保留了说腇峁褂蛴隢说木砬菪峁褂颉为了进一步阐明甆融合基因致白血病的机制,,并对它们的细胞内定位、转录调节机制进行了研究。研究表明蚇发生融合不仅改变了蚇在细胞内的定位,而且赋予了B技せ罨钚浴R虼宋颐侨为,有别于其他染色体易位导致的融合基因对下游基因的转录抑制作用,转录激活作用可能是喙氐娜诤匣蛑掳籽2〉牧硪恢挚赡艿幕啤同患者间存在显著的个体差异和遗传背景,产生了某些实验结果的偏差。而细胞水平的体外研究又缺乏神经、休液、及免疫等机体重要机制的调节,不能反映生物体的真实情况。结合实验室实际情况,我们选择遗传背景较为一致的近交系小鼠,通过受精卵显微注射方式建立瓾;蛐∈竽P停进一步研究瓾姆⒉』啤⒀罢倚碌囊┪锇械愫椭瘟品椒ㄌ峁┬的实验平台。关键词:、籒、、⒆;蛐∈
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第一部分一例颊咧蠳融合基因的克隆言引血液疾病。细胞遗传学的研究发现,约%的;颊咧校⑸撬婊娜旧体异常报道;其中,大部分的染色体异常发生率低,一些在全球范围内也仅有数例报道。在精细的细胞遗传分析基础上,许多白血病相关融合基因相继被发现并而出染色体易位或倒位形成的融合基因的蛋白产物能够异常调节造血细胞的增殖、分化或凋亡活动。这些蛋白为针对特异的遗传异常而设计的新药提供了靶标。而且,世界卫生组织己将染色体异常及相应