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生化实验二蛋白质测定.ppt

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文档列表 文档介绍

实验二人血清蛋白质含量测定
蛋白质测定的主要方法
根据蛋白质元素组成——凯氏定氮法;
根据蛋白质组成特点建立的比色法——双缩脲法,lowry改良法,考马斯亮蓝染色法,BCA法;
根据蛋白质的吸收特性建立的紫外分光光度法;
蛋白质的紫外吸收
蛋白质分子中含有共轭双键的芳香族氨基酸。它们具有吸收紫外光的性质。
其最高吸收峰在280nm波长处,且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比。
Tyr
Trp
双缩脲法测定蛋白质
实验原理——双缩脲反应
180ºC
双缩脲在碱性条件下可与铜结合成紫红色复合物
Cu2+
OH-
蛋白质具有双缩脲结构,在碱性条件下也能与铜结合成紫红色复合物在一定的范围内,颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比——1-10mg,因此通过比色法可以测定蛋白质含量。
标准曲线的作用和绘制
根据Lambert-Beer定律,A与C成正比
配制一系列标准液
C1、C2、C3,
在max下,测相应的A1、A2、A3……。
Ax
Cx

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生化实验二蛋白质测定

生化实验蛋白质含量测定

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实验二、蛋白质定量测定

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