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生化实验-血糖的测定.ppt


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文档列表 文档介绍
血糖的测定
实验四
血糖及血糖水平的概念:
血糖:指血液中的单糖:葡萄糖
血糖水平:血浆中葡萄糖浓度
血糖总维持在恒定水平: ~
调节血糖水平的激素:胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。
血糖水平异常:⑴高血糖及糖尿病;⑵低血糖
临床:血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。
科研:在代谢疾病的研究中,常测定血糖。在某些药物的研究中,也涉及血糖的测定。
测定血糖的意义
测定方法
无机化学法: Folin-Wu法
有机化学法:邻甲苯***法
酶法:葡萄糖氧化酶法
血糖测定的常用方法
葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理
(1)葡萄糖+O2+H2O
(2)H2O2+4-氨基安替吡啉+苯酚
葡萄糖酸+H2O2
葡萄糖氧化酶(GOD)
H2O +红色醌式物质
过氧化物酶
(POD)
Trinder反应
505nm
光吸收法测定
相对血糖浓度
分光光度计的工作原理
朗伯-比尔定律
朗伯定律:A=k1L
比尔定律:A=k2C
朗伯-比尔定律:如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响,则吸光度与溶质的浓度和溶液的厚度的乘积成正比。
A=KLC
朗伯-比尔定律应用
A标=KC标L
A样=KC样L
标准品法测定未知样品含量
C样=
A样
A标
×
C标
1. 接通电源,调整波长。
2. 比色杯中加入空白及待测样品,并放入分光光度计中,注意:加入样品量不超过比色杯体积的2/3。
3. 调模式为“透射比”,对空白对照进行调“0”(开盖)和调“100”(闭盖)。
4. 调模式为“吸光度”,将空白对照调“0”,测定待测样品的吸光度值。
分光光度计的使用

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  • 时间2015-10-27