血糖的测定实验四血糖及血糖水平的概念:血糖:指血液中的单糖:葡萄糖血糖水平:血浆中葡萄糖浓度血糖总维持在恒定水平:~:胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。血糖水平异常:⑴高血糖及糖尿病;⑵低血糖临床:血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。科研:在代谢疾病的研究中,常测定血糖。在某些药物的研究中,也涉及血糖的测定。测定血糖的意义测定方法无机化学法:Folin-Wu法有机化学法:邻甲苯***法酶法:葡萄糖氧化酶法血糖测定的常用方法葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理(1)葡萄糖+O2+H2O(2)H2O2+4-氨基安替吡啉+苯酚葡萄糖酸+H2O2葡萄糖氧化酶(GOD)H2O+红色醌式物质过氧化物酶(POD)Trinder反应505nm光吸收法测定相对血糖浓度分光光度计的工作原理朗伯-比尔定律朗伯定律:A=k1L比尔定律:A=k2C朗伯-比尔定律:如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响,则吸光度与溶质的浓度和溶液的厚度的乘积成正比。A=KLC朗伯-比尔定律应用A标=KC标LA样=KC样L标准品法测定未知样品含量C样=A样A标×,调整波长。,并放入分光光度计中,注意:加入样品量不超过比色杯体积的2/3。“透射比”,对空白对照进行调“0”(开盖)和调“100”(闭盖)。“吸光度”,将空白对照调“0”,测定待测样品的吸光度值。分光光度计的使用
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