hplc法测定藤黄中藤黄酸和新藤黄酸的含量.doc

[ 标签: 标题 1] 作者:周安, 李庆林, 彭代银, 吴鸿飞, 范琪, 王效山【摘要】目的建立藤黄中藤黄酸和新藤黄酸的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法, 色谱柱为 Hypersil ODS C18( mm× 250 mm,5 μ m) ;流动相:甲醇-% 冰醋酸水溶液(93 ∶ 7), 流速 mL/min ;检测波长为 360 nm, 外标法定量。结果藤黄酸线性范围为 ~ 49μ g, 回归方程 Y= 11 + 232 781X(r = 9,n = 5), 平均回收率 %,RSD = %(n = 6) ;新藤黄酸线性范围为 ~ 51 μ g, 回归方程 Y= 75 + 226 301X(r = 7,n = 5), 平均回收率 %,RSD = %(n = 6) 。结论本法精密度高, 重复性好, 简便、可靠, 可作为藤黄的质量控制方法。【关键词】高效液相色谱法;藤黄;藤黄酸;新藤黄酸;含量测定 Key words : HPLC ; Gamboge ; Gambogic acid ; Gambogenic acid ; Content determination 藤黄系藤黄科植物藤黄 Garcinia hanburyi . 所分泌出的干燥树脂, 性寒, 味酸、辛、涩, 有毒, 具破血散结、解毒、止血、杀虫之功效, 用于治疗瘰疠、痈疽、疖肿等顽疾。近 20年 rongguanlilunwen/ 来研究发现, 藤黄酸、新藤黄酸具有显著的抗肿瘤活性, 医药工作者对其尤为重视。国内外特别是我国学者对藤黄及其活性成分藤黄酸和新藤黄酸的含量测定方法做了大量的研究工作, 其中大部分采用 TLC 法和 HPLC-ELSD 法[1-2] 。为了进一步完善中药藤黄的质量控制, 本试验采用 HPLC-DAD 法同时对藤黄酸和新藤黄酸进行含量测定, 此法简便、可靠, 可作为中药藤黄的质量控制方法。 1 仪器与试药 Agilent1100 高效液相色谱仪( 包括 G1313A 自动进样器, G1315ADAD 检测器,G1311A 四元剃度洗脱泵,G1316A 柱温箱, 色谱工作站); BP2110 电子分析天平( 德国 Sartorius 1/100 000) ; KQ-300VD B 超声波清洗器( 昆山超声仪器有限公司) 。甲醇为色谱纯, 水为双蒸水。藤黄酸对照品、新藤黄酸对照品均由安徽中医学院药物研究所提取分离,HPLC 归一化法测定其纯度, 分别为 % 和 % 。 2 方法与结果 色谱条件色谱柱:大连依利特产 Hypersil ODS (5μ m, mm× 250 mm) ; 流动相:甲醇-% 冰醋酸水溶液 93∶7 ;流速 mL/min ;检测波长: 360 nm ;柱温: 25℃;进样量: 25μL 。在该色谱条件下, 新藤黄酸和藤黄酸的保留时间分别为 、 min 。理论塔板数按新藤黄酸计算不低于 3 000, 新藤黄酸和藤黄酸分离度均大于 。色谱图见图1。 样品溶液的制备将藤黄原料药粉碎,过 40 目筛, 取藤黄药材粉末