肝纤维化发病机理及复方中药抗肝纤维化的研究硕士论文.pdf

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我国是肝脏疾病的高发区,每年因此失去劳动能力乃至死亡的患者众
多,肝病成为威胁人民生命健康的常见原因之一。慢性肝病的重要病理基
础是肝纤维化。肝穿活检表明,轻型慢性肝炎肝纤维化发生率达
中、重度者高达。肝纤维化发展成肝硬化,乃至出现门脉高压、腹
水、肝性脑病甚至肝癌等是临床多见的棘手问题。目前,肝纤维化的发病
机理尚不完全清楚,对其治疗也无良策,因此,在这方面进行研究,对肝
病整体治疗策略的制定有重要意义。肝纤维化的形成和发展是一个复杂的
生物学过程,涉及到胶原蛋白的合成和分解两个方面,但各种原因所致的
肝纤维化其共同途径主要是肝星状细胞等间质细胞被激活后合成分泌大量‘
的细胞外基质,且其降解减少,致使胶原蛋白在肝脏大量沉积,逐步形成
肝纤维化。以往对肝纤维化发病机理的研究主要集中在胶原蛋白的合成这
一环节,而对其降解环节研究较少。我们选择血吸虫病肝纤维化动物模型
以及临床重症肝炎患者作为研究对象,运用免疫和分子生物学技术,从胶
原蛋白的合成和分解两个方面,特别是分解代谢方面,对肝纤维化发病机
理进行探讨,为临床预防和治疗提供依据。

现在用于肝纤维化治疗的药物主要有一干扰素、秋水仙碱、青霉***
山
等,前者价格昂贵,后者副作用较大。在我国,中草药治疗肝病有悠久的即
历史,它价格低廉,药源广,副作用少,更适合我国国情。本研究将血吸
虫病肝纤维化动物模型作为治疗对象,自拟中药组方进行治疗,从血清学、
组织学、分子生物学水平对其抗肝纤维化教果进行评价,从胶原蛋白的合

成和分解两个方面探讨其作用机理,为下一步的临床应用打下基础。
在肝纤维化的研究中,需要对纤维组织进行组织学量化处理。记分法
只能半定量,立体形态测量法烦琐,我们试用天狼猩红对组织进行特染,
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用比色法和图象分析法对组织胶原定量,以找出准确、简便的组织胶原定
量方法,作为评估抗纤维化疗效的客观指标之一。

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肝纤维化发病机理及复方中药抗肝纤维化的研究
摘要
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目神方法
从胶原蛋白的合成和分解两个方面探讨肝纤维化的发病机理,评估复
方中药抗肝纤维化的疗效,探讨其可能的作用机制。
压课题分动物实验和临床实验两部分进行。
‘、建立兔血吸虫病肝纤维化模型,设正常对照组、病理对照组、复
方中药治疗组和秋水仙碱治疗组。用血清学方法检测实验动物血清中前胶
原型胶原、透明质酸、层粘连蛋白的含量用组
织学特染和免疫组化技术检测肝组织胶原蛋白总含量,工、型胶原蛋
白含量,金属蛋白酶一〔蛋白表达。用分子生物学方法检测肝
组织型胶原、金属蛋白酶和金属蛋白酶抑制因子一
的表达,并将复方中药治疗组和其它组进行对比研究。
二、运用上述方法检测重症肝炎患者肝组织胶原蛋白总含量,、
型胶原蛋白含量,工型前胶原、血小板衍生生长因子一
和的表达。
三、用天狼红对肝组织进行特染,并行图像分析和胶原蛋白微量侧定。
结果尹
一、成功建立兔血吸虫病肝纤维化模型,表现为血清纤维化指标升高,
肝组织门管区、纤维间隔增宽,虫卵结节形成,虫卵周围大量纤维沉积。
二、复方中药治疗组,血清纤维化指标含量较病理对照组显著下降,
肝组织胶原蛋白含量和型胶原的表达也明显减少。
三、与病理对照组相比,复方中药治疗组表达显著增
加, 的表达明显减少,蛋白表达无显著差异。

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四、与正常肝组织相比,重症肝炎患者的肝组织工、型胶原蛋白大
量沉积, 和型前胶原的表达显著增加,
的表达与型前胶原的表达呈显著正相关,和总的胶原
含量,、型胶原蛋白含量也呈显著正相关, 型前胶原的表
达和型胶原蛋白的表达呈显著正相关。
五、与正常对照组相比,重症肝炎患者的肝组织表达
显著增加,表达也显著增加。肝组织胶原蛋白总含量,、
型胶原蛋白含量与表达无明显相关性,与
表达呈显著正相关。
六、在动物实验,天狼红特染图像分析和胶原蛋白微量测定两种方法
显示,中、西药治疗均能使肝纤维蛋白显著减少。对于未经抗肝纤维化治
疗的临床标本,两法的测定结果显示,肝硬化和重症肝炎患者的肝组织胶
原含量较非肝病患者显著增加,两法的测定结果有很好的一致性·
结论
一、肝纤维化的发病机理与胶原蛋白基因表达增加,胶原蛋白的合成
增加有关,同时与金属蛋白酶组织抑制因子增加,抑制金属