华中师范大学实****报告
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华中师范大学
实****报 告
实****单位:湖北省水产科学研究所
院 系:生命科学学院生物技术系
姓 名:李梓谦
学 号:2011211715
指导老师:刘德立教授
时 间:—
目 录
实****概述……………………………………………………………1
一、正文
1、实****单位简介…………………………………………………2-3
2、实****工作………………………………………………………4-7
二、 实****体会
1、本次实****的收获…………………………………………………8
2、对实****教学工作的建议…………………………………………8
三、致谢……………………………………………………………9
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本中心是经农业部授权的、经过国家计量认证的、向社会出具公正数据的专职检测机构,是社会公益性非盈利的技术服务事业单位。
、监督、评审、鉴定;
;
、水产品质量检测任务;
、行业标准或地方标准的制订和有关标准的试验验证工作;
,对实施证书管理(生产许可证、质量认证、无公害食品)的渔业环境和水产品质量进行检测。
检测中心全称:农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心(武汉)
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图2(实****地)
2、实****工 作
对待检测的水产品和进行处理
对鱼类(包括鲫鱼、鳊鱼、鳜鱼、草鱼等)进行切片,绞肉机绞碎装袋;对螃蟹剖壳取肉与蟹黄装袋;对小龙虾取肉装袋。
我主要进行的是***霉素的检验
1、标准规格酶标仪
2、高速离心机
3、电热恒温培养箱
4、超声清洗器
5、氮气吹干仪
6、干净的试管和Eppendof管
7、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
8、蒸馏水,容量瓶等
9、试剂:乙酸乙酯、正己烷、***化钠
10、***霉素酶联免疫试剂盒
1、样本稀释液:用去离子水将浓缩稀释液(4x)按1:3体积比进行稀释。
2、洗液工作液:用去离子水将浓缩稀释液(4x)按1:9体积比进行稀释。
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6瓶,浓度分别为10 ng/ml,5 ng/ml, ng/ml, ng/ml, ng/ml, ng/ml。样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml。
标准品
S1
S2
S3
S4
S5
S6
浓度(ppb)
0
;
加入6毫升乙酸乙酯,漩涡5分钟;
4000rmp中离心5分钟;
取4毫升上清,于60摄氏度下氮气吹干。
将各种试剂移至室温平衡至少30分钟,
按需要取出微孔条,每空加标准品/混匀的样品50μL,然后加入酶结合物50μL和抗体50μL,用板贴封板,轻轻震荡混匀,室温反应30分钟。
取出微孔板,甩干孔内液体,用稀释好的洗液工作液洗板4次。没次浸泡30秒,250μL/孔,在吸水纸上拍干。
显色:每孔加入底物溶液100μL,轻轻震荡,25摄氏度避光显色15分钟。
依序每孔加终止液50μL。
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用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
图2(取样)
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图3(样品前处理加样)
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