培养基(含测试试剂)质量控制规程.doc

文件类型:操作指导书第01版第 0次修改文件名称:培养基(含测试试剂)质量控制规程文件编码:WHHDSPJT/QM03-506D-00 编制人:王飞批准人:戴春阳培养基(含测试试剂)质量控制规程一、培养基制备要求培养基的一般性状:液体培养基应透明、清亮,颜色符合要求。固体培养基应表面湿润但无水汽、平整光滑,厚薄均匀,一般厚度在 3mm ( M-H 平板厚度不得<4mm ) 。斜面的长度不得超过试管长度的 2 /3)。PH 值应在规定值± 的范围内。培养基制备的质量将直接影响微生物生长。因为各种微生物对其营养要求不完全相同,培养目的的不同,各种培养基制备要求如下: 1. 根据培养基配方的成分按量称取,然后溶于蒸馏水中,在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。 测定及调节: PH 测定要在培养基冷至室温时进行,因在热或冷的情况下,其 PH 有一定差异, 当测定好时, 按计算量加入碱或酸混匀后, 应再测试一次。培养基 PH 值一定要准确, 否则会影响微生物的生长或影响结果的观察。但需注意因高压灭菌可影响一些培养基的 PH 降低或升高,故不宜灭菌压力过高或次数太多,以免影响培养基的质量,指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完 PH 后再加入。 3. 培养基需保持澄清,便于观察细菌的生长情况,培养基加热煮沸后, 可用脱脂棉花或绒布过滤, 以除去沉淀物, 必要时可用鸡蛋白澄清处理, 所用琼脂条要预先洗净凉干后使用, 避免因琼脂含杂质而影响透明度。 4. 盛装培养基不宜用铁、铜等容器,使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。 5. 培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的, 又要注意不因加热而降文件类型:操作指导书第01版第 0次修改文件名称:培养基(含测试试剂)质量控制规程文件编码:WHHDSPJT/QM03-506D-00 编制人:王飞批准人:戴春阳低其营养价值, 一般 121 ℃ 15min 即可, 如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等, 则应采用低温灭菌或间歇法灭菌, 一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、 TTC 、抗菌素等, 待基础琼脂高压灭菌后凉至 50℃左右再加入。 6. 每批培养基制备好后,应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。如果是生化培养基,使用标准菌株接种培养,观察生化反应结果, 应呈正常反应,培养基不应贮存过久,必要时可置 4℃冰箱存放。 7. 目前各种干燥培养基较多, 每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察, 各种培养基用相应菌株生长试验良好后方可应用, 新购进的或存放过久的干燥培养基,在配制时也应测 PH ,使用时需根据产品说明书用量和方法进行。 8. 每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等应做好记录,以备查询。二、培养基的质量控制培养基的质量控制主要包括三方面的内容: pH 测试、无菌试验以及已知菌生长试验。如果使用商品化脱水培养基,严格按照说明操作, 一般不必再进行 pH 测试。如果使用基础物质进行培养基制备, 在培养基冷却后须进行 pH 测试。如果 pH 测得值与预期值相差 单位,则需要酸碱调节;无菌试验一般为随机抽样 3-5 %,在 35℃条件下培养 48h 。如果抽样中每个培养基上出现 2 个以上菌落, 证明本批培养基已被污染; 已知菌生长试验