基因工程知识点梳理.doc

生物选修 3 知识点专题 1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望, 进行严格的设计, 通过, 赋予生物以,创造出。基因工程是在上进行设计和施工的,又叫做。(一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——(1 )来源:主要是从中分离纯化出来的。(2 )功能:能够识别的核苷酸序列,并且使每一条链中的两个核苷酸之间的断开,因此具有。(3 )结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式: 和。 2.“分子缝合针”——(1) 两种 DNA 连接酶( )的比较: ①相同点:都缝合键。②区别: 来源于大肠杆菌, 来源于 T 4 噬菌体, 只能将双链 DN A 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来; 而能缝合两种末端,但连接的之间的效率较低。(2) 与 DNA 聚合酶作用的异同: ? ? ???????????????????? DNA 聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。 DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端,形成磷酸二酯键。必须需要模板 3.“分子运输车”——(1 )载体具备的条件: ①。②,供外源 DNA 片段插入。③,供重组 DNA 的鉴定和选择。(2 )最常用的载体是, 它是一种。(3 )其它载体: (二)基因工程的基本操作程序第一步: 1. 目的基因是指: 基因。 2. 原核基因采取获得, 真核基因是。人工合成目的基因的常用方_和_。 3. 从基因文库中获取基因文库(1) 概念: 将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。(2) 类型: 基因组文库和部分基因文库(如 cDNA 文库) 文库类型基因组文库部分基因文库(如 cDNA 文库) 构建方法将某种生物体内的 DNA 全部提取出来, 选用适当的限制酶,将 DNA 切成一定范围大小的 DNA 片段, 分别与运载体连接, 导入受体菌群体中储存, 每个受体菌中都含有一段不同的 DNA 片段。用某种生物发育的某个时期的 mRN A 反转录产生的多种互补 DNA (也叫 cDNA ) 片段, 与载体连接后储存在一个受体菌群中。文库大小基因中启动子( 具有启动作用的 DNA 片段) 基因中内含子( 位于编码蛋白质序列内的非编码 DNA 片段) 基因多少物种间的基因交流 技术扩增目的基因(1 )原理: (2 )过程:第一步: 加热至 90~ 95℃; 第二步: 冷却到 55~ 60℃,; 第三步: 加热至 70~ 75℃,。第二步: (核心步骤) 1. 目的:使目的基因在受体细胞中,并且可以,使目的基因能够。 2. 组成: +++ (1 )启动子:是一段有特殊结构的,位于基因的,是识别和结合的部位,能驱动基因,最终获得所需的蛋白质。(2 )终止子:也是一段有特殊结构的