(5)制片、染色及显微观察.ppt

食品微生物检验食品微生物检验规范操作基础培训规范操作基础培训 5 5 制片、染色及显微观察制片、染色及显微观察福建出入境检验检疫局技术中心食品所微生物实验室福建出入境检验检疫局技术中心食品所微生物实验室 主要内容: 主要内容: ?§ 1 清洗、消毒和灭菌操作?§ 2 培养基的制备?§ 3 采样和取、制样?§ 4 接种、分离纯化?§ 5 制片、染色及显微观察?§ 6 实验室安全基础知识 显微操作 显微操作显微镜是微生物检验中最常用的精密光学仪器。显微镜的种类很多,在实验室中常用的有:普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。食品微生物检验中最常用的是普通光学显微镜。显微镜的使用方法显微镜的使用方法用光学显微镜观察微生物形态时,一般遵循先低倍镜观察, 后高倍镜观察,再油镜观察。低倍镜操作方法低倍镜操作方法 ,使用粗调焦螺旋将镜筒自上而下的调节,避免物镜镜头接触到玻片而损坏镜头和压破玻片。当物镜镜头与载物台的玻片相距 2~ 3mm 时停止; (注意右眼应该同时睁着),并转动粗调焦螺旋,使镜筒徐徐上升,直到看清物象为止; 3. 再用微调焦螺旋调至清晰。注意: 粗调调焦螺旋只用于上调载物台,如观察显微镜时,用粗调节器调节,有压碎载玻片、损坏物镜的危险。因此,用细调焦螺旋调节视野使其更清晰高倍镜操作方法高倍镜操作方法 ; 。换用高倍镜后,视野内亮度变暗,因此一般选用较大的光圈并使用反光镜的凹面; 。观看的物体数目变少,但是体积变大。注意: 高倍镜观察时,光线需增强。油镜操作方法油镜操作方法 ; ,于载玻片上滴一滴香柏油; ,让油镜镜头浸入香柏油(至油晕不再扩大为止); 。注意: 油镜的操作需要较强的关线,故需将光线调至最强。用10倍和/或40倍物镜为随后的高倍油镜( 90倍或100 倍)选择合适的视野( 油镜镜筒上通常刻有 或 OEL 等标志) 油镜用后的处理: 第一遍:用擦镜纸拭去镜头上的油; 第二遍:用擦镜纸蘸少许二甲苯(香柏油溶于二甲苯)擦去头上残留的油迹; 第三遍:再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。普通显微镜的保养普通显微镜的保养(1) 观察完后,移去观察的载玻片标本。(2) 用过油镜的,应先用擦镜纸将镜头上的油擦去, 再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭 2—3次,最后再用擦镜纸将二甲苯擦去。(3) 转动物镜转换器,放在低倍镜的位置。 (4) 将镜身下降到最低位置,调节好镜台上标本移动器的位置,罩上防尘套。镜头清洁,只能用软而没有短绒毛的擦镜纸,物镜的清洗,可选用不同的溶剂,如酒精、***和二甲苯等,其中最安全的是二甲苯。