食品中乳酸菌的检测技巧.ppt

食品中乳酸菌的检测 乳酸菌 lactic acid bacteria ?一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称。本标准中乳酸菌主要为?乳杆菌属( Lactobacillus )、?双歧杆菌属( Bifidobacterium ) ?链球菌属( us )。?5培养基和试剂? MRS ( Man Rogosa Sharpe )培养基及莫匹罗星锂盐( Li-Mupirocin )改良 MRS 培养基:见附录 A 中 。? MC 培养基( Modified Chalmers 培养基):见附录 A中 。? % 蔗糖发酵管:见附录 A中 。? % 纤维二糖发酵管:见附录 A中 。? % 麦芽糖发酵管:见附录 A中 。? % 甘露醇发酵管:见附录 A中 。? % 水杨苷发酵管:见附录 A中 。? % 山梨醇发酵管:见附录 A中 。? % 乳糖发酵管:见附录 A中 。? 七叶苷发酵管:见附录 A中 。? 革兰氏染色液:见附录 A中 。? 莫匹罗星锂盐( Li-Mupirocin ):化学纯。实验器具 8 ×1瓶内含 150mL 左右 MC 培养基 8 ×1瓶内含 150mL 左右 MRS 培养基阳性对照(全班) 保加利亚乳杆菌 4×1瓶内含 200mL (2组共用) 8 ×1瓶内含 225mL 生理盐水 8 × 20 试管 8 ×1瓶内含 150mL 左右改良 MRS 培养基 8 × 20 个平皿 8×1支( 10mL )移液样 8 ×6支(1mL) 吸管实验原理相关标准注意事项操作步骤试验流程 7 操作步骤? 样品制备? 样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。? 冷冻样品可先使其在 2 ℃~ 5 ℃条件下解冻,时间不超过 18 h ,也可在温度不超过 45 ℃的条件解冻,时间不超过 15 min. ? 固体和半固体食品:以无菌操作称取 25 g 样品,置于装有 225 mL 生理盐水的无菌均质杯内,于 8000 r/min ~ 10000 r/min 均质 1 min ~ 2 min ,制成 1:10 样品匀液;或置于 225 mL 生理盐水的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min ~ 2 min 制成 1:10 的样品匀液。? 液体样品:液体样品应先将其充分摇匀后以无菌吸管吸取样品 25 mL 放入装有 225 mL 生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分振摇,制成 1:10 的样品匀液。。实验原理相关标准注意事项操作步骤试验流程稀释选择稀释度倒平板涂布观察计数乳酸菌(稀释度 X2) 双歧杆菌(稀释度 X2) 嗜热链球菌(稀释度 X2) 乳酸菌总数双歧杆菌数嗜热链球菌数乳杆菌数 10 -4 10 -5 10 -6培养基阳性对照组和空白试验实验原理相关标准注意事项操作步骤试验流程 GB 16321-2003 -- 1X10 6 有活菌检出乳酸菌、( cfu /ml) ≥杀菌乳酸菌饮料未杀菌乳酸菌饮料指标项目