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11 1 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 岛津液相色谱培训--- 定量基础知识岛津国际贸易(上海)有限公司分析中心 22 2 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 定量分析基本公式 C i = f i A iC i = f i H i 被测组分的浓度与检测器的响应值,在某些条件限定下成正比的关系。 Ci:组分浓度,f i : 响应因子,与组分的物理化学性质和检测器的性质有关 Ai:组分响应面积 Hi:组分响应高度实际修饰公式: Y=aX+b 33 3 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 定量分析的基本要求需要有纯物质作标准被定量组分峰要与其它峰达到基线分离符合定性参数要求选择合适的定量方法 44 4 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 定性方法色谱峰的定性鉴别?通过保留值(通常是保留时间)进行定性?需要指定保留时间误差范围(时间窗、时间带) 在相同的分析条件下?保留时间相同并不肯定是同样的组份?保留时间不同肯定不是同样的组份 55 5 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 定性确证?仅仅通过保留时间并不能完全确证该物质通过加入标准物确认通过改变色谱条件确认光谱和质谱信息也可以作为进一步确证手段其他仪器方法确证 66 6 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 定量方法面积归一化外标法内标法标准加入法 77 7 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 面积归一化法公式: % 100 %??? Ai Ai Ci 特点: 1)无需做校正,简便,快速 2)进样量不严格要求 3)所有组分都流出并且被检测到 4)所有组分的响应因子都相同不能作为准确定量的方法,仅在特定情况下使用 88 8 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 外标法浓度 C 1C 4C 3C 2 浓度面积 A 1A 2A 3A 4C 1C 2C 3C 4 A 1A 2A 3A 4峰面积标准曲线标准曲线 99 9 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 外标法特点特点: 1)不需所有峰都流出或被检测到 2)需要标准样品 3)进样量必须准确 4)仪器必须有良好的稳定性 5)只对所测组分作校正是实验室最常用的定量方法,定量结果准确 10 10 10 Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited 内标法目标 C 1C 4C 3C 2 浓度面积 A 1A 2A 3A 4C 1 /C ISC 2 /C ISC 3 /C ISC 4 /C IS A 1 /A ISA 2 /A ISA 3 /A ISA 4 /A IS浓度比: 目标/ 内标面积比: 目标/ 内标 Calibration curve Calibration curve 内标 C ISC ISC ISC ISA ISA ISA ISA IS