上海交通大学遗传学下午5组果蝇杂交实验方案.pptx

果蝇杂交实验方案陈宇冲伦敏翔王丰 2 : 验证基因伴性遗传的规律 验证基因连锁与交换规律并计算重组值? 、实验原理: ? 黑腹果蝇( Drosophila melanogaster ) ? 黑腹果蝇生活史? 、实验原理: 黑腹果蝇的饲养方法①果蝇饲料的配制: 果蝇是以酵母菌作为主要食料的,因此实验室凡能发酵基质,都可用作果蝇饲料。常用的饲料有玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。配方如下。? 、实验原理: ②果蝇的饲养果蝇的培养温度以 25℃左右为宜。湿度可根据培养基不同时期的状况调整, 当发现培养基比较干燥时,可以用大的培养皿盛满水敞口放入培养箱中,调整箱内湿度;每天光照 9h为宜;培养基 3周左右更换一次。果蝇的正常可生存温度在 12℃~ 32 ℃。 25℃是果蝇生长发育和繁殖最适的温度。在 18℃时果蝇的生长发育和繁殖速度会明显减慢,但果蝇会明显变得肥壮,通常是用这个温度进行果蝇的保种。过高或过低都会造成果蝇的死亡。 研究的性状及显隐性伴随性染色体的遗传现象称为伴性遗传。果蝇的性染色体有 X和Y两种,雌蝇为 XX ;雄蝇为 XY。位于性染色体上的基因其传递方式与常染色体上的基因不同,他们的遗传方式与雌雄性别有密切关系。与复眼色素有关的基因在 X染色体上,通过野生型(红眼)与突变(白眼)杂交,经过 F1和 F2子代可以观察到伴性遗传现象。用雌性白眼果蝇和雄性红眼果蝇杂交,在子一代可以观察到雌性都成了红眼,而雄性都是白眼,此现象又称交叉遗传。子一代相互交配得子二代,雌性果蝇的红眼与白眼比例为 1:1 ,雄的红眼与白眼比例也是 1:1 。? 、实验原理: 连锁与交换验证实验将白眼、小翅、刚卷毛( wmsn/wmsn )的三隐性突变体雌果蝇与红眼、长翅、直刚( +++/Y )毛野生型雄果蝇杂交, F1代可产生三杂合体雌果蝇和三隐性雄果蝇( wmsn/+++ )。由于 F1代雄果蝇的 Y染色体上不携带相应的等位基因,因而表现出 X染色体上三个隐形基因所控制的性状,故相当于一个隐性纯合体。将 F1代的三杂合体雌果蝇( wmsn/+++ )与三隐性雄果蝇( wmsn/Y )测交,通过统计测交后代中各种表型果蝇的个体数,就可以估计出各基因之间的交换值,判断出基因之间的相互顺序,绘制出连锁遗传图。亲本的纯种培养 01 杂交的遗传式 03 实验结果的分析与讨论 05 杂交亲本的确定 02 后代的性状观察与记录 04 ? ? 亲本的纯种培养? 亲本饲养瓶的准备? 果蝇的麻醉与转瓶?第一天,将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选,其中在野生型中挑出 3-4 对,突变型中挑出 7-8 对,分别培养, 25°C培养 8天? ? 杂交 1(伴性遗传的观察) ? 杂交用饲养瓶的准备? 亲本处女蝇的挑选?第八天, 19: 00,待培养瓶中出现蛹并且呈黑色时,将两个品系的亲代果蝇麻醉弃去。野生型品系继续培养,待用。?第九天, 7: 00,将孵化的突变型成蝇麻醉后分出雌蝇,至另一培养瓶,培养处女蝇待用。 19: 00,继续挑选雌果蝇,放入处女蝇培养瓶中,以后每隔 12小时挑选一次,直至挑出 10只处女果蝇。? 雄性果蝇的挑选?麻醉野生型品系,挑出 10只雄果蝇,放入突变处女蝇培养瓶中,杂交 25°C 培养。杂交组合为:突变型(雌) ×野生型(雄) ? F1 代生长情况的观察? F1 代性状的观察记录及统计?杂交果蝇培养 8天以后,将亲代果蝇麻醉弃去。观察新长出的子一代果蝇性状,并记录。