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生物制片与显微摄影技术赵艳玲 学时学分: 18 学时, 1学分课程性质:专业必修课/ 任选课适用专业:生物技术专业课程内容:讲解植物显微技术的原理和方法, 并最终使学生掌握植物石蜡制片的方法及其各个环节的原理和技术要点。课程安排: 概述讲授 1次, 3个学时,了解植物显微制片技术的基本方法、程序和基本原理。其余时间分为 5次实验,共计 15 学时,系统学****石蜡切片的制片技术,在实验中熟悉、巩固和扩展生物制片的基本理论和技能。所以本课程是以实验为主的课程。讲课内容和学时安排: 实验第次授课或实验题目主要实验内容课时数理论概述生物显微制片与摄影概述、石蜡切片制作程序、原理; 3 1配制固定液等试剂、取材、固定清洗容器、配制固定液、各级度脱水剂、透明剂、取材、固定材料、脱酸; 3 2脱水渗蜡观摩、包埋脱水渗蜡观摩、包埋、清洗载玻片和盖玻片、配制粘片剂; 3 3切片、贴片修整蜡块、切片、贴片; 3 4苏木精染色、封片染色及相关程序、封片、贴标签 3 5 番红-固绿染色、封片和显微摄影脱水、对染、封片等相关程序、贴标签、显微摄影 3 实验分组: 实验中每八至十人组成为一个实验小组。每个实验小组从取材料开始,完成石蜡制片的全过程。如脱水、透明、浸蜡、包埋等环节是全天连续而不能间断的过程,需要实验小组的几个同学轮班完成。每个同学必需了解和掌握各个环节的工作技能。实验要求: 要求每个小组制作合格的石蜡制片不少于 20 片。每人独立完成实验报告和实验记录,并且独立完成制作切片不少于 2 片。成绩评定办法: 成绩由五个部分构成 2 0% 。但实验课旷课缺勤一次, 扣 20 分,请假一次扣 10 分,迟到、早退、未完成预定工作适当扣分。 10% 。 2 0% 20% 30% 第一章绪论一、生物制片的目的把想要观察的材料制作成适合于在显微镜下观察的薄片,以显示其组织和细胞的结构。二、生物制片的类型显微制片法一般包括切片法、整体封片法、涂片法和压片法 4大类。?(一)临时制片?(二)永久制片(一)临时制片多数用于活体制片观察(一种临时制片)。将生物个体或一部分置于载玻片上,加水和盖玻片进行观察。包括:徒手切片、装片、涂片、解离压片等临时制片。(在植物形态解剖学实验等课程已经讲授,详细过程不再赘述) 优点:简单、省时,能进行活体观察; 缺点:常因组织过厚光线不易透过,活体材料多为无色,未染色观察效果差,不易长期保存。(二)永久制片 2~ 25 微米之间,一般动植物材料的切片以厚 10 微米左右为合适。用锋利的刀片将材料切成薄片,便于在显微镜下观察。为了能够切出薄而且完整的切片,对幼嫩的材料(如,幼嫩的根尖、茎尖、叶片等)必须进行包埋,对坚硬的材料(如木材、竹材)必须进行软化而不用包埋。切片法在生物制片技术中最为重要。