11级植物生理实验讲解内容.doc

1 植物生理实验讲解内容实验一植物组织水势的测定(小液流法) 1、原理(1 )水分移动的总原则: 从高水势到低水势。当把植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,水势越大,越易失水;水势越小,越易得水;因此,会出现三种情况: 植物组织的水势<外液的水势,组织吸水,外液( a )浓度变大植物组织的水势>外液的水势,组织失水,外液( b )浓度变小植物组织的水势=外液的水势,组织既吸水又失水,外液( c )水分保持动态平衡(2 )据比重大小判断小液流的移动方向: 为判断以上三种情况,把侵有组织的溶液进行着色,当把着色的 a、b、c 三种外液用针管以小液流法放回对应的原溶液中,也出现三种情况: 当浓度变大的外液( a )放入原溶液中↓,说明植物组织的水势<外液的水势当浓度变小的外液( b )放入原溶液中↑,说明植物组织的水势>外液的水势当水分保持动态平衡的外液(c) 放入原溶液中≈( 不动), 说明植物组织的水势=外液的水势 2 、材料: 毛果含笑叶;梧桐树叶;***或牵牛花 4、方法( 选用 C aC l 2 溶液为外液) 思考题 1、试述小液流法测定植物组织水势的原理。测定中应注意什么? (1) 遵照两个原理:①水分移动的总原则—从高水势到低水势。②根据比重大小判断小液流的移动方向。(2) 测定中应注意: ①取材时尽量避开叶脉和伤口、部位要一致、要迅速(以免失水) ,材料要混匀;②母液要均匀, 不能颠倒顺序;③放小液流时不能用力过大;④观察液流方向要细心等]。 2、某组实验出现了小液流法↓↑↑↓↑的情况,请分析出现错误的可能原因。最有可能出错的应是第四支试管。出错的原因有以下可能: (1) 在配制甲组试管溶液时, 试管没有充分的摇匀; (2) 在配制甲组浓度梯度溶液时, 第四支试管溶液不准确, 浓度过低; (3) 用注射器在甲组试管中挤出小液滴时,用力过猛。 3、测定水势的方法有: 小液流法;电导仪法;折射仪法。实验二植物组织中游离氨基酸总量的测定——茚三***显色法( ( 蛋白质) 的游离-NH 3 可与水合茚三***反应, 生成蓝紫色的化合物; 在一定范围内, 颜色的深浅与游离氨基的含量成正比,因此,可用分光光度法测定其含量。思考题 1、本方法除游离氨基酸外还有那些成分可被显色?据此评价本方法的实用意义。蛋白质和多肽中也有游离氨基, 所以也会被显色。据此评价本方法的实用意义为——此法只有 2 除去蛋白质和多肽的前提下才能应用。 2、植物组织游离氨基酸测定为什么要除去蛋白质?方法 2 是如何除去蛋白质的? 因为蛋白质降解后也会产生游离氨基酸,所以要去除蛋白质。方法 2 是用沸水浴加热 20 分钟使蛋白质凝固而除去。 3、简述氨基酸测定的原理、方法和步骤。原理:氨基酸( 蛋白质) 的游离 NH3( 氨基) 可与水合茚三***反应, 生成蓝紫色的化合物;在一定范围内,颜色的深浅与游离氨基的含量成正比,因此,可用分光光度法测定其含量。方法和步骤:取数株小麦苗→称取 g 左右→剪成碎段→放入大试管中→用移液管准确加入 10ml 蒸馏水→沸水浴加热提取 20 分钟——冷却→取 1ml 待测液放入 20 ml 刻度试管中→加 1ml 茚三***→用滤纸扎口→放入 80℃水浴中加热 15 分钟——取出, 用柠檬酸缓冲液稀释至 10ml →用 722 分光光度计