诊断临床病原体检查.ppt

诊断临床病原体检查
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标本的采集、运送和检查方法
一．标本的采集和运送
所有采集标本均置于无菌或清洁容器中，不能接触消毒剂和抗菌药物。
血液：一般在发热初期和高峰期采集，如已用抗生素，则在下次用药之前采集。***采血量为每次10-培养。
检测病原体刺激机体产生的抗体，IgM型抗体检出为新近感染指标。
细菌耐药性检查
抗菌药物的作用机制
干扰细菌细胞壁的合成，使细菌不能生长繁殖。
影响细菌细胞蛋白质的合成，使细菌丧失生长繁殖的物质基础。
破坏核酸的代谢，阻碍遗传信息的复制。
抗生素的广泛使用所造成的抗生素的选择性压力使医院感染控制面临严峻挑战，因此对细菌耐药性的发生机制和耐药监测便成为临床微生物检测中的一项重要工作。

104 cfu/ml
4
2
1



0
mg/ml
耐药菌监测试验
(MRS)检测
包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCoN)。
不能使用青霉素和头孢菌素类抗生素治疗。
（PRSP）
青霉素是治疗肺炎链球菌的首选药物，耐药菌株对青霉素治疗无效。
应用苯唑西林纸片检测。
3. 超广谱β-内酰***酶（ESBL）的检测
主要由革兰阴性杆菌产生，质粒介导的对青霉素和三代头孢菌素以下类抗生素广泛耐药。
产酶株不能单独采用青霉素类和三代头孢治疗。
临床感染常见病原体的检查

新现和再现传染病
多重耐药的细菌的出现
医院感染和条件致病菌的增加

细菌感染是临床常见的感染类型
病毒感染发病率最高
真菌感染的发病率明显上升
细菌感染 细菌培养是最重要的确诊方法
病毒感染 细胞培养是最常用的病毒分离方法，抗原和血清学检测临床应用最广泛
真菌感染 真菌培养和形态学检测最常用
寄生虫感染 从病人血液、体液、排泄物中检查出寄生虫的某一发育虫期，是目前最可靠的诊断方法
细菌感染免疫检测
“O”试验
溶血素“O”是一种A群链球菌的***，属于菌体蛋白，能溶解红细胞。溶血素“O”具有抗原性，可使人产生相应抗体，称抗链球菌溶血素“O”（anti-streptolysin “O”test，ASO）。
A群链球菌感染2-3周后，血清中可出现抗溶血素“O”的抗体。
滴度升高表明近期有A群链球菌感染，常见于活动性风湿热、风湿关节炎、急性肾小球肾炎等。
2．肥达反应（widal reaction WR）
伤寒沙门菌的菌体O抗原和鞭毛H抗原均可刺激机体产生相应抗体，O抗原刺激机体产生的是IgM，出现较早，H抗原产生的是IgG，出现较晚，持续时间较长。
WR利用伤寒和副伤寒沙门氏菌菌液为抗原，检测病人血清有无相应抗体的一种凝集试验。
O抗体>1:80，H抗体>1:160
A、B、C抗体>1:80
O升高H不高 可能是感染早期或其他沙门菌
H升高O不高 可能是既往感染或预防接种
性传播性疾病的实验室检查
性传播性疾病（sexual transmitted disease STD）是一组主要通过性行为为传播途径的侵犯皮肤、性器官和全身多脏器损害的疾病。
病原学和临床类型
细菌-淋病奈瑟菌，杜克雷嗜血杆菌
螺旋体-梅毒螺旋体
病毒-HIV、HSV、HPV
支原体、衣原体
真菌、原虫

分为HIV-1和HIV-2两型，主要通过检测血液中相应抗体诊断，ELISA用于筛选，Western Blot用于确诊。
HIV感染后数日或数周内常不能检出抗体，称窗口期，95%的受染者在3个月内可测出抗体。

暗视野显微镜检查：在皮损处，用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液，见有活动的梅毒螺旋体。
主要依靠血清学试验，根据所用抗原不同，梅毒血清试验分为以下两大类：
非梅毒螺旋体抗原血清试验 用心磷脂作抗原，测定血清中抗心磷脂抗体，亦称反应素。本试验敏感性高而特异性较低，目前一般作为梅毒的筛选试验。
性病研究实验室试验（Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL）用心磷脂、卵磷脂及胆固醇为抗原，需用显微镜读取结果。
不加热血清反应素试验（Unheated Serum Reagin USR）也是VDRL抗原的改良，敏感性及特异性与VDRL相似。
快速血浆反应素试验（Rapid Plasma reagin test，RPR）：是VDRL抗原的改良，优点是肉眼可读出结果。
梅毒螺旋体抗原血清试验 用梅毒