最新课题2-多聚酶链式反应扩增DNA片段.ppt

最新课题2-多聚酶链式反应扩增DNA片段.ppt专题五 DNA 和蛋白质技术知识回顾知识回顾 DNA DNA 分子的结构分子的结构 C C、、H H、、O O、、N N、、P P 1 1、组成元素、组成元素脱氧核苷酸脱氧核苷酸 2 2、基本单位、基本单位 3 3、脱氧核苷酸结构、脱氧核苷酸结构复****复****DNA DNA 复制的条件复制的条件解旋酶: 解旋酶: 打开打开 DNA DNA 双链双链 DNA DNA 母链: 母链: 提供提供 DNA DNA 复制模板复制模板 4 4种脱氧核苷酸: 种脱氧核苷酸: 合成子链的原料合成子链的原料 DNA DNA 聚合酶: 聚合酶: 催化合成催化合成 DNA DNA 子链子链引物: 使 DNA 连接脱氧核苷酸 ATP 1 1、、DNA DNA 分子的平面结构分子的平面结构 ATGC AG C T氢氢键键 5'端 3'端 5'端 3'端-OH 端为 3′磷酸基团的末端为 5′。 DNA 的双螺旋结构是如何形成的 2 2、复制过程解读、复制过程解读①① DNA DNA 的解旋的解旋亲代亲代 DNA DNA 分子利用细胞提供的能量在解分子利用细胞提供的能量在解旋酶的作用下氢键断裂,部分双螺旋链旋酶的作用下氢键断裂,部分双螺旋链解旋为两条平行的双链解旋为两条平行的双链②② RNA RNA 引物的合成引物的合成, ,以单链以单链 DNA DNA 为模板,在引物酶的作用为模板,在引物酶的作用下合成小段的下合成小段的 RNA RNA 引物引物③③ DNA DNA 的生成的生成以单股的以单股的 DNA DNA 为模板,在为模板,在 DNA DNA 聚合酶的作聚合酶的作用下,在用下,在 RNA RNA 引物的末端引物的末端由由5 5’’端- 端- 3 3’’端合成端合成 DNA DNA 。。④④切掉引物生成冈崎片断切掉引物生成冈崎片断在核酸酶的作用下切掉引物。在在核酸酶的作用下切掉引物。在 DNA DNA 聚聚合酶的作用下将引物部位换上合酶的作用下将引物部位换上 DNA DNA ,此,此时的时的 DNA DNA 片断称为冈崎片断片断称为冈崎片断⑤⑤ DNA DNA 片断的连接片断的连接在在 DNA DNA 连接酶的作用下将冈崎片断连接起来。形连接酶的作用下将冈崎片断连接起来。形成一条完整的新的成一条完整的新的 DNA DNA 链。新链与旧链构成新的链。新链与旧链构成新的子代子代 DNA DNA