特罗凯(厄洛替尼)预处理通过多种机制改善非小细胞肺癌异种移植物的光动力治疗.docx

特罗凯(厄洛替尼)预处理通过多种机制改善非小细胞肺癌异种移植物的光动力治疗摘要皮生长因子受体( EGFR )的异常表达是许多癌症,包括非小细胞肺癌( NSCLC ), 头颈鳞状细胞癌和卵巢癌的常见特征。尽管目前 EGFR 是治疗这些癌症的最受欢迎的分子靶点,但是用小分子抑制剂(即特罗凯(厄洛替尼))或单克隆抗体(即西妥昔单抗)抑制受体并不能作为独立治疗提供长期的治疗效果。有趣的是,我们已经发现,添加特罗凯(厄洛替尼)至光动力治疗( PDT )可以改善典型的特罗凯(厄洛替尼)耐药 NSCLC 肿瘤异种移植物的治疗反应。在 H460 人肿瘤异种移植物的 PDT 之前,特罗凯(厄洛替尼)以三个剂量施用,与单独 PDT 之后的 16%相比,达到了 63天的完全缓解率为 63%。当将特罗凯(厄洛替尼)加入 A549 NCSLC 异种移植物的 PDT 时,发现类似的益处。改善的反应伴随着血管停止增加,特罗凯(厄洛替尼)增加了 PDT 对内皮细胞的体外细胞毒性。通过体内施用特罗凯(厄洛替尼)来增加光敏剂(苯并卟啉衍生物一酸环 A; BPD ) 的肿瘤摄取;然而, BPD 水平的上升仅部分解释了特罗凯(厄洛替尼)对 PD T 的益处。因此,用特罗凯(厄洛替尼)进行预处理增加了 PDT 效应的多种机制, 其共同导致治疗功效的大的改善。这些数据表明,在 PDT 之前,特罗凯(厄洛替尼)的短期给药可以大大提高甚至特罗凯(厄洛替尼)耐药性肿瘤对治疗的反应性。关键词: 特罗凯(厄洛替尼),光动力治疗,非小细胞肺癌, EGFR , VEGF 介绍侵袭性肿瘤的主要特征是表皮生长因子受体( EGFR )的异常表达, EGFR 是促进细胞增殖,血管生成和存活的信号蛋白。几个 EGFR 抑制药物被用于治疗恶性肿瘤,例如非小细胞肺癌( NSCLC ),头和颈部鳞状细胞癌( ),和乳腺癌( 1, 2)。这些药物包括 EGFR 靶向抗体(即西妥昔单抗)和小分子抑制剂(如吉非替尼,特罗凯(厄洛替尼))。 EGFR 抑制的功效基于肿瘤的分子特征而变化。例如,携带 EGFR 激活突变的肿瘤往往对 EGFR 靶向治疗更敏感,而表现 KRAS 突变的肿瘤反应较差;而一些肿瘤类型是对 EGFR 抑制最初敏感,其他人将获得抗性,而使患者有限的治疗选择( 1, 3)。因此,虽然 EGFR 已被广泛用作治疗几种类型的肿瘤的分子靶点,但作为独立治疗的受体的抑制并不能一致地产生临床上的阳性结果。光动力疗法( PDT )使用光,光敏剂和氧气的组合来造成细胞损伤。与靶向 EGF R 的药物 PDT 的组合表明,综合治疗可以增加细胞毒性(4,5)。光敏剂的 EGF R 靶向降低了 PDT 后的细胞增殖( 6),抗 EGFR 抗体和小分子抑制剂可以增加 PDT 治疗的肿瘤或细胞培养物中的凋亡和/或抑制增殖( 7-10)。在卵巢癌,鼻咽癌和膀胱癌肿瘤模型中, PDT 与西妥昔单抗联合应用治疗效果( 7-9)。本研究的目标是双重目标。首先,我们建立了在 NSCLC 人类肿瘤异种移植物的 PDT 之前添加 EGFR 的小分子抑制剂特罗凯(厄洛替尼)的治疗效果。特罗凯(厄洛替尼)是一种口服药物,因此 PDT 前给药可以翻译成术中 PDT ,其中术后重症监护病房的患者口服药物不可行。第二,我们已经阐明了使用这个协议改进响应的机制。已经确定并研究了特罗凯(厄洛替尼)对 PDT 诱导的肿瘤细胞毒性,内皮细胞损伤和血管功能的影响,对其对长期 PDT 反应性的贡献。这些研究结果提供了一些洞察,这将为临床开发纳入 EGFR 与 PDT 靶向治疗方案提供依据。材料和方法细胞系 EGF R野生型 KRA S突变体人 NSCL C细胞系 H46 0和 A54 9获自 American Type Culture Collection ( Manassas , VA )。 H460-mCherry 细胞和 SVEC (永生化小鼠内皮细胞)由 Drs 提供。宾夕法尼亚大学的 Jay Dorsey 和宾夕法尼亚州费城科学大学的 Bin Chen 分别。将细胞保持在补充有 10%胎牛血清和 1%青霉素/链霉素的 RPMI-1640 ( H460 , SVEC )或 o's 改良的 Eagle 培养基( A549 )中。所有细胞系均使用 IDEXX Bioresearch ?(2014 年5月)的 Cell Check ? Plus 认证服务进行鉴定并确认为无支原体。肿瘤模型通过在雌性裸鼠( Athymic , Ncr-nu /nu; National Cancer Institute , Frederick , MD ) 的右肩上皮内注射 1×10 6 个细胞来繁殖肿瘤。当肿瘤达到 6-8 毫米的直径时开始研究。调查由宾夕法尼亚大