六味地黄丸对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响的论文.doc

六味地黄丸对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响的论文.doc六味地黄丸对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响的论文作者:肖子曾, 戴冰, 刘磊, 冷旺, 邹双华【摘要】目的探讨六味地黄丸对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法原代培养大鼠前脂肪细胞, 用四***偶氮唑盐(mtt) 方法检测六味地黄丸含药血清对前脂肪细胞的增殖情况, 以酶组织化学法检测其对前脂肪细胞分化过程中的磷酸甘油脱氢酶(gpdh) 的影响,油红 o 染色方法测定其对细胞内脂肪积聚的影响。结果 10% 以内六味地黄丸含药血清对大鼠前脂肪细胞的增殖有促进作用, 对分化过程中的 gpdh 升高有抑制作用, 而对于分化过程中的脂肪积聚则有促进分解的作用。结论六味地黄丸能促进大鼠前脂肪细胞的增殖, 抑制大鼠前脂肪细胞的分化。【关键词】六味地黄丸;大鼠;前脂肪细胞;细胞增殖;细胞分化 abstract : objective to investigate the influence of liuethods rat preadipocytes on proliferation of rat preadipocytes tt method, the influence of liu on expression of gpdh ined by enzyme tissue chemical method, the effect on lipid accumulation ined by oil red o staining. results liu stimulated rat preadipocyte proliferation, inhibited gpdh up-regulation during differentiation, inhibited lipid accumulation in cell differentiation ulated rat preadipocyte proliferation, inhibited rat preadipocyte differentiation. key em 低糖培养基( 批号 123k83031), 磷酸二羟***(批号 027k1635), 上述试剂均购自 sigma 公司; mtt( 批号 1313bl1) 购自 amresco 公司;标准胎牛血清( 批号 20050617) 购自兰州民海生物工程有限公司;油红 0( 批号 830120) 购自北京夏新试剂分装厂。 dms o 购自宜兴市化工厂;水为双蒸水;其余试剂均为分析纯。 动物健康 l, 搅拌, 煮沸, 使之完全溶解后, 添加纯净水至 375 ml, 使其药液浓缩至 g/ml( 以原药材含量计), 供实验用。 空白及含药血清样品制备取 l, 离心血液, 取上清液过 μm 微孔滤膜后用于实验。 大鼠前脂肪细胞的培养取雄性大鼠腹股沟部纯净脂肪颗粒,ph 缓冲生理盐水(pbs) 洗涤, 剪成 ~l mm3 大小均匀的小颗粒,以1 000 r/min 离心 10 min, 取上层的纯脂肪颗粒轻轻地铺于经培养液润湿的培养瓶壁上。 3~ 5 min 后徐徐加入含 20% 胎牛血清的 dmem/ 低糖培养液 5~ 10 ml, 塞紧瓶塞, 将底面翻转朝上。 37℃、 5% c02 培养 1~2 h, 待粘