低剂量辐射对环磷酰胺致肝功能损伤的影响.doc

1 低剂量辐射对环磷酰***致肝功能损伤的影响【关键词】低剂量辐射;环磷酰***;氧化应激;肝损伤【关键词】低剂量辐射; 环磷酰***; 氧化应激; 肝损伤1 材料和方法 材料清洁型昆明种小白鼠 53 只,雄性,体质量( 20±2)g,4~6 周龄,由青岛市实验动物和动物实验中心提供. 随机分为空白对照组、荷瘤对照组( 假照组)、荷瘤低剂量照射组( LDR 组) 、荷瘤环磷酰***化疗组( CTX 组)和荷瘤低剂量照射联合化疗组( LDR+CTX 组) . 常规饲养, 饮水、食物不限. 方法 荷瘤动物模型的制备小鼠先适应 1 wk , 常规饲养. S180 肉瘤细胞腹腔传代 10d, 抽取腹水, 将处于对数生长期 2 的肿瘤细胞按常规方法制成 8× 1010/L 的悬液, 于小鼠左腹股沟皮下各接种 8× 106 ( mL )个肿瘤细胞(空白对照组除外) . 照射条件 60Co 照射, 源皮距 cm , 使用自制纸盒盛装小鼠,中间放置 30 cm 水模滤过射线,剂量率为 mGy/min ,总剂量为 75 mGy ,均为一次性全身照射. 荷瘤鼠照射及化疗情况接种肿瘤后第 8 日,用游标卡尺测量肿瘤水平方向最大长径 a(cm) 及垂直方向最大横径 b(cm) ,各重复两次,取平均值,舍弃肿瘤过大( ab> cm2 ) 或过小( ab< cm2) 的小鼠, 按下列公式计算肿瘤平均体积: V= (1/2)ab2. 比较无差异后,对 LDR 组、 LDR+CTX 组小鼠进行低剂量全身照射. 30h 后(第 9 日) 对 CT X组和 LDR+CT X 组小鼠腹腔注射 mg ;第 11~ 12 日处死所有小鼠. 标本采集眼眶采血:固定小鼠,稍用力将头下压使眼球外突, 用眼科镊子将眼球摘除, 将血滴入 EDTA 抗凝管中, 立即混匀,置4℃保存. 3500 r/min 离心 10 min , 收集血浆用于肝功等指标的检测. 取肝脏:将取血后的小鼠脱颈 3 椎处死, 迅速取出肝脏,于4℃条件下制备成 100 g/L 的肝组织匀浆, 3500 r/min 离心 10 min , 取上清-20 ℃保存备用,1wk 内测定超氧化物歧化酶( SOD ) ,丙二醛( MDA )及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX). 统计学处理:采用 for window s 统计软件包中的单因素方差分析法对结果进行统计分析, 组间比较采用两两比较的 q 结果各组肝组织 MD A 含量及 SOD, GSHP X 活性(表 1) 和血浆丙氨酸氨基转移酶( ALT )活性及蛋白含量均有一定差异(表 2).表1 各组肝组织氧化和抗氧化指标的比较(略) 表2 各组血浆 ALT 活性及蛋白含量的比较(略) 3 讨论 CTX 应用于临床可致肝损伤,表现为血清转氨酶、 4 胆红素升高等. 药物诱导的肝脏损伤机制可能与氧化应激有关[1]. 倪秀雄等[2]的研究显示, S180 荷瘤小鼠经小剂量重复腹腔注射环磷酰***后, 肝组织抗氧化防御系统的抗氧化功能不同程度下降,肝组织 MDA 含量升高;病理检查也发现肝细胞点状及小灶性坏死, 均提示氧化