低温乙醇蛋白分离实现自控后对人血白蛋白质量的影响.doc

1 低温乙醇蛋白分离实现自控后对人血白蛋白质量的影响【摘要】目的低温乙醇血浆蛋白分离工艺实现自控后被分离的人血白蛋白各项质量指标和收获率进行评价。方法按照《中华人民共和国药典》 2005 年版三部有关规定的方法和标准对低温乙醇分离的人血白蛋白样品各项指标进行测定,并将测定的结果与自控前的制品进行比较。结果连续测定血浆蛋白分离实现自控后 42 批人血白蛋白样品,与该工艺实现自控前连续 35 批成品检定结果进行比较,发现其人血白蛋白的纯度、收获率均有明显的提高; 多聚体有明显的下降,其它指标(离子含量、吸光度等)均无明显改变, 且制品质量稳定, 符合《中国药典》 2005 年版三部有关要求。结论通过人血白蛋白各项质量指标、收获率的比较, 低温乙醇蛋白分离过程实现自控后, 进一步提高了人血浆蛋白的内在质量,同时,还全面提升了该工艺的分离水平,使得血浆蛋白分离过程中的温度、乙醇浓度、离子强度和蛋白含量等因素变得更加容易控制, 使得制品各项质量指标更加稳定,批间差异缩小,更加符合 GMP 管理的要求。【关键词】血浆蛋白分离; 自动控制; 纯度; 多聚体 2 人血白蛋白( HAS ) 具有维持血管内胶体渗透压, 结合并转运体内各种脂肪酸、激素、离子以及多种药物的重要生物学功能[1], 已广泛应用各种低白蛋白血症或创伤性休克。自从 1946 年 Cohn 和他的同事们发表了低温乙醇( Cohn 6 法)分离白蛋白以来[ 2] ,相隔十年 Nitschmann 和 Kistle r 于 1954 年又提出了另一种改变的低温乙醇分离血浆蛋白方法[3], 该改良方法简化了操作, 缩短了生产周期, 提高了血浆白蛋白的回收率( 当时的最大收率为 血浆), 降低了乙醇的消耗,是目前国际上普遍使用的方法之一。低温乙醇法的最大优点是适应工业化、自动化的生产要求,为了充分发挥该工艺的潜能,适应 GMP 管理的要求, 不断提高血浆蛋白制品的内在质量, 增加收获量, 在不改变原来基本工艺路线的前提下,我们于 2004 年末实现了低温乙醇血浆蛋白分离工艺系统的自控( 包括温度控制、加液控制、自动清洗等)。通过血浆蛋白分离工艺实现自控后, 使批处理的血浆能力增加了一倍,工艺操作更加符合 GMP 管理的要求,血浆蛋白能充分有效的混合反应, 蛋白分离的五个控制因素: 反应 3 液温度、 pH 值、离子强度、酒精浓度和蛋白浓度得到了严格、准确的控制, 避免了人为操作的误差, 经过连续 4 年人血白蛋白的质量指标的综合分析评价, 实现自控后, 人血白蛋白的纯度、收获率均有明显的提高; 多聚体有明显地下降, 其他指标( 如钾离子含量、吸光度等) 与自控前无明显差异,均在质量标准范围之内。 1 材料与方法 材料 人血白蛋白样品( 2003 年~ 2006 年上半年期间制备的人血白蛋白检定样品) 由兰州生物制品研究所血液制剂室提供。 仪器设备分光光度计(日立 340 0型); 电泳仪( DYY- Ⅲ2型, 北京六一仪器厂); 扫描仪( BECKMAN CSDS -20 0 型); 液相色谱仪( SP8800 , USA ); 火焰光度计( CORNING 4 480 型, USA )。 方法 纯度测定纯度测定按《中华人民共和国药典