体内构建骨软骨复合体修复骨软骨缺损的实验研究(1).doc

1 体内构建骨软骨复合体修复骨软骨缺损的实验研究(1) 动物实验结果大体观察。术后 12 周: A 组新生组织表面平整、光滑, 与周围软骨界线模糊,端面显示软骨厚度与正常软骨相近; B 组修复高度较周围软骨水平相近, 但软骨层厚度比 A 组明显偏薄,无光泽,与周围软骨界线尚清楚; C 组部分接近正常修复高度,修复组织呈黄色,局部凹陷。术后 16 周, A 组缺损修复区组织与周围关节软骨相整合, 软骨缺损区被光滑白色半透明的组织覆盖,与周围软骨组织外形无差异(图 4);B 组缺损区修复组织与周围软骨部分整合在一起,光泽较差(图 4);C 组缺损处修复组织低凹新生组织软,无光泽, 与周围软骨组织区别明显。组织学观察。术后 12 周: A 组缺损区形成透明样软骨组织, 比周围正常软骨偏厚, 软骨细胞数量多, 出现明显的规律,表面层的软骨细胞平行关节面排列,深层纵向排列,软骨基质染色较四周时淡,软骨下骨丰富。 B 组边缘区厚度与 2 周围正常软骨接近, 软骨细胞排列不规则, 与周围软骨结合可,无明显裂隙存在。近中央区仍以纤维组织修复为主,细胞数很少,局部有裂隙。 C 组表面为纤维组织,细胞成分较少。术后 16周,A 组缺损区软骨厚度与正常软骨组织接近, 细胞排列出现明显规律,表面层的软骨细胞平行关节面排列,深层纵向排列,与透明软骨组织相似,软骨下骨形成, 潮线基本恢复, 与周围正常软骨连接较好(图 5)。B 组软骨细胞排列不规则,中央修复区大部分为纤维组织修复(图 6)。C 组缺损区内主要为纤维组织(图 7)。 统计学分析采用 SPSS10. 0 统计软件包分析, 数值以±s 表示,以P< 0. 05 表示差异有显著性意义。表 3 关节软骨缺损的组织学评分标准表4 各组软骨修复组织学评分结果各时间段A组与 B 组、 C 组比较均有显著性差异, *P < 。 3讨论有研究认为对于微环境尚未受到严重破坏的组织修复或再生治疗,不需要进行体外诱导即可用干细胞直接移植修复,而对于缺损或微环境严重受损的组织修复或再生治疗, 3 则需要对干细胞进行定向诱导后移植[1]。作者的实验结果表明,在体外对 MSCs 进行诱导培养, (1) 可以使细胞扩增; (2) 可以向软骨细胞定向分化。在体外构建成熟的组织工程化软骨, 是在模拟体内微环境的条件, 探索和研究软骨种子细胞在支架内黏附、增殖及种子细胞与支架材料的相容性即软骨形成的条件、机制的问题。作者把细胞- PLGA 支架复合体在体外培养 1 周后, 塑成圆柱状, 采用马赛克移植方法植入缺损部位,底部为 MSCs 拟 PLGA 支架复合体,表层部分为诱导培养的 MSCs 拟 PLGA 支架复合体。在体内微环境的作用下,迅速生成软骨组织。在 12 周时,软骨组织已充满了整个缺损区, 随后深层软骨组织逐渐被软骨下骨替代。16 周时软骨细胞出现分层排列,与周围正常组织无明显差别。在制造骨软骨缺损模型的时候,损伤区会释放生物活性因子, 包括 TGF 拟β、 IGF 拟1和 BMP [2]。早期复合组织植入缺损部位后, 在这些细胞因子的作用下, 经诱导的 MSCs 细胞在 PLGA 支架材料中迅速增殖, 表层的复合体在关节内滑液细胞因子和周围软骨组织微环境的作用下形成早期软骨组织。而深部的复合体被来自于损伤区的血