冠心丹参片有效部位三七总皂苷的含量测定.doc

1 冠心丹参片有效部位三七总皂苷的含量测定作者: 魏惠珍, 张洁, 张红红, 王跃生, 方海红, 饶毅, 李新南【摘要】目的紫外分光光度法测定冠心丹参制剂中三七总皂苷的含量。方法 UV 法, 测定波长 548 nm 。结果线性范围 2~ mg ;平均回收率:% , RSD 为 % 。结论方法简便,灵敏度和准确度较高,结果满意。【关键词】冠心丹参片; 三七总皂苷; UV 法 Abstract : ObjectiveTo establish the determination method of total saponins of Panax notoginseng in Guanxin Danshen tablet by UV. MethodsUV, the detection wavelength was at 548 nm. ResultsThe linear range was in the range of ~ . The average recovery was %, and RSD was %(n=6). ConclusionThe method is simple, highly accurate, and it can be used for quality control of Guanxin Danshen tablet. 2 Key words : Guanxin Danshen tablet; Total saponins of Panax notoginseng; Spectrophotometry 冠心丹参片由丹参、三七、降香油 3 味药组成,具活血化淤、理气止痛之功效,为《中国药典》 77 方剂。临床用于气滞血淤所致的胸闷、胸痹等,冠心病见上述证候者[1] 。其中三七为该方的君药,具滋补强壮,活血化淤,消肿止痛等功效。现代研究表明, 三七总皂苷是三七中的有效活性部位,具有强心、扩张冠状动脉、增加冠状血流量、抗动脉粥样硬化等药理作用[ 2]。根据国家新药的有关规定, 对冠心丹参片的二次开发, 需对其有效部位建立测定方法。目前对冠心丹参片中有效部位三七总皂苷的分析尚未见报道。为综合评价冠心丹参片质量, 本文首次采用紫外分光光度法测定了冠心丹参片中三七总皂苷的含量,优选了显色剂的比例并通过 D101 大孔树脂柱的分离去除丹参酚酸类成分的干扰, 为更好地控制冠心丹参片提供质量评价手段。 1 仪器与试药 3 日本岛津 UV-2550 紫外分光光度计, UV-Probe 工作站; 岛津 AUW220D 型十万分之一分析天平;梅特勒 AB104- N 型万分之一分析天平;大孔吸附树脂 D101 型(天津市海光化工有限公司)。人参皂苷 Rg1 对照品( 批号: 110810-200205 ) 由中国药品生物制品检定所提供; 甲醇、乙醇、冰乙酸、香草醛等试剂均为分析纯; 冠心丹参片( 由江西本草天工科技有限责任公司提供)。 2 方法与结果 测定方法 检测波长的选择对照品溶液与样品溶液于 400 ~ 700 nm 波长范围进行扫描,发现 548 nm 处有最大吸收。实验中选择测定波长为 548 nm 。 样品中三七总皂苷的测定取样品,研成细粉,取约 70 mg, 精密称定,置烧瓶中,加甲醇 50 ml 回流 h,放冷, 滤过, 用甲醇洗涤容器, 滤液并洗涤液至 100 ml 量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 从中精密吸取溶液 10 ml, 蒸干, 4 残渣加水溶解并转移至 5 ml 量瓶中, 用水稀释至刻度, 再从中精密吸取溶液 1 ml, 装入已处理好的 D101 大孔树脂柱(湿法装柱, 用水 100 ml 预洗, 内径 cm , 树脂装至高 14 cm ), 先用 20% 乙醇 50ml 洗脱, 洗脱液弃去, 继用 70% 乙醇洗脱, 收集 100 ml, 蒸干, 残渣用甲醇转移至 2 ml 量瓶中, 并稀释至刻度, 作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液 1 ml, 置具塞试管中, 80℃水浴挥干,冷却至室温,按“ ”项下方法显色,即得。 阴性干扰实验取处方中缺三七总皂苷的阴性样品,照供试品溶液制备项下操作,即得阴性对照供试液。对冠心丹参供试品溶液及缺三七阴性对照溶液分别进行紫外光谱扫描。在 548 nm 波长处进行扫描。紫外吸收光谱图(见图1~2) 。冠心丹参中缺三七的阴性对照样品无干扰。图1 冠心丹参样品 UV 吸收光谱图(略) 显色方法精密吸取对照品溶液/ 样品溶液 ml, 置具塞试管中,置 80℃水浴挥干, 冷却至室温, 加新