ABI_7300的使用维护及校准标准操作程序解决方案.doc

ABI 7300的使用维护及校准标准操作程序
1、目的:ABI PRISM 7300型核酸扩增荧光检测仪能够正确和正常的使用,保证扩增及结果分析的标准化、规范化。
2、适用范围:ABI PRISM 7300型核酸扩增荧光检测仪。
3、操作人:段建平蔡果
4、操作程序

:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开ABI7300系统软件,进行实验。
创建荧光定量PCR检测文件:
双击7300 System Software 软件图标。从File菜单中选择New(或单击工具栏中的“新建”按扭)
在New Document窗口中,Assay项选择“Absolute Quantification(Standard Curve)”,选择“完成”,就会出现一个96孔的空白面板。
双击此空白面板中的任一方格,就会弹出“Well Inspector”。
在“Well Inspector”窗口单击“Add Detector”就会弹出“detector manager”窗口。
“File \ New...”,就会弹出“new detector”菜单
在“new detector”窗口进行样本信息输入:
1)在“Name”可以输入:HBV_20060101按自己的喜好输入易于区分的name。
2)在“Reporter Dye”选择所用试剂探针所采用的报告基团如:FAM
3)在“Quencher Dye”选择所用试剂探针所采用的报告基团如:TAMRA
4)在“Color”点击右边颜色小方格后可以按自己的喜好选择颜色。
5)设置好之后点击OK会回到“detector manager”窗口
“detector manager”窗口依次点击“Add To Plate Document”、“Done”。
完成了Detector的设置;会重新回到“Well Inspector”菜单,请做如下设置:
1)在“Passive Reference”选折None;
2)在“Use”下的小方框中打勾;
3)在“Sample Name”一般在参考标准品反应孔中****惯性的输入:试剂批次号如:HBV2006018。
设置好之后关闭“Well Inspector”菜单。
设置循环条件:
“Instrument”,通过面板上的“Add Cycle”、“Add Step”、“Data Collection”等按钮,参照试剂说明书设置好“Instrument”面板。
File (文件) > Save As (另存为),为绝对定量反应板文件输入一个文件名,然后单击 Save (保存)。
,按照面板设置放好自己的试验样品,关闭仓门。
。在仪器运行 PCR 程序期间, Instrument (仪器)选项卡上会显示实时状态信息,并报告荧光信号强度。程序运行结束后,状态值和按钮变为灰色,而且 Analysis (分析)按钮( ) 变为可用状态,并显示信息提示您程序是否成功运行。程序运行期