非常实用--专题2--课题3 分解纤维素的微生物的分离.ppt

纤维素:
棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物;
纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质;植物的根、茎、叶等器官中都含有大量纤维素。
①地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨;
②农作物秸秆、废弃的木料、服装面料等富含大量的纤维素,但被利用的机会很少、效率低;
纤维素生物燃料:最有希望替代石油能源
转化
生物燃料
首先要解决的是如何将纤维素分解?
纤维素:
一种由葡萄糖首尾相连而成的多糖。
土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把纤维素分解为葡萄糖,后再利用。
课题3 分解纤维素的微生物的分离
P27
纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
纤维二糖
C1酶、Cx酶
葡萄糖苷酶
葡萄糖
纤维素
一、基础知识
①取二支20mL的试管
小实验:纤维素酶分解纤维素的实验
②各加入一张滤纸条
③,-醋酸钠缓冲液 11ml和10ml
甲乙
④在乙试管中加入1mL纤维素酶
⑤两支试管固定在锥形瓶中,放在
140r/min的摇床上振荡1h
⑥结果:乙试管的滤纸条消失
讨论:乙试管的滤纸条为什么会消失?
甲试管的作用是什么?
?
?
酶
不添加纤维素酶,但需加入等量的缓冲液,不能加入蒸馏水,否则影响溶液的PH

①筛选纤维素分解菌的方法。该方法可以通过________反应直接筛选。
刚果红染色法
颜色
②其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,
当纤维素被分解后,红色复合物无法形成,
出现以为中心的,可以
通过_____________ 来筛选纤维素分解菌。
红色复合物
纤维素酶
纤维素分解菌
透明圈
是否产生透明圈
土壤取样
选择培养
梯度稀释
将样品涂布到鉴别培养基
挑选菌落
①在什么样的环境取样?
②若找不到合适的环境,
怎么办?
“旁栏”
①培养的目的? ②选择培养基的特点?
什么样的菌落?
①鉴别培养基的特点?
②如何鉴别?
二、实验设计
此步骤可省略
是否需要,根据样品中目的菌株数量多少来确定
产生明显透明圈的菌落
纯化培养
1、纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,原因是__________
P29【资料二】选择培养
液体
没有添加琼脂
2、该培养基对微生物_____(具有,不具有)选择作用。如果具有,其选择机制是
_______________________
具有
以纤维素粉为主要碳源,能分解纤维素的微生物才可以大量繁殖;
碳源
无
机
盐
碳源、氮源、生长因子
3、能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用?
自变量为培养基的种类,即普通培养基与选择培养基,可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或将纤维素改为葡萄糖。
目的:增加纤维素分解菌的浓度,即“浓缩”所需的微生物
培养基组成
提供的主要营养物质
CMC-Na 5~10g
碳源
酵母膏 1g
碳源、氮源、生长因子
KH2PO4
无机盐
土豆汁 100mL
碳源、生长因子
琼脂 15g
凝固剂
上述物质溶解后,加蒸馏水定容至1000mL
鉴别纤维素分解菌的培养基
(水溶性羧***纤维素钠)
(固体培养基)