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随机聚合酶链反应法检测细菌方法学的建立
张山,李思,王文武
微生物与感染编辑部,上海200032
基金项目:国家高新技术研究发展计划(863)(2009ZZ06…)
第一作者:张山,详细联系方式(电话、E-mail)
通信作者:王文武,详细联系方式(电话、E-mail)
必须提供
随机聚合酶链反应法检测细菌方法学的建立拟20字以内
张山姓与单名之间不空格
,李思,王文武
微生物与感染编辑部, 上海 200032
摘要:以非结构式(勿用“目的、方法、结果、结论”4要素形式)撰写,且应能独立反映文章的内容。
为证实乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)3022nt-1787nt缺失突变体编码蛋白TS'X'(源于DNA聚合酶读码框架,T代表TP区,S'为部分缺失的spacer区,X'为截短的X蛋白)具有抗a干扰素(IFN-a)作用并确定其功能区域,首先以聚合酶链反应(PCR)扩增获得TS'X'全长及片段TS'(含TP区及部分缺失的spacer区),。重组载体以FuGENE6转染Huh7肝细胞,48 h后裂解细胞,通过融合表达的多肽表位抗体,以蛋白质印迹法(Western blot)证实目的蛋白可在Huh7肝细胞中表达。-a反应报告载体p6-16CAT按分子数5:1、10:1、15:1、30:1 共转染Huh7肝细胞,转染后48 h给予终浓度为100 IU/ml 的IFN-a2a刺激,作用24 h后裂解细胞,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胞内***霉素乙酰基转移酶(CAT)含量。结果显示,与空白载体相比,随着TS'X'及TS'重组表达载体转染量的递增,Huh7胞内CAT值逐渐降低(n=6,P<),但TS'X'与TS'之间无显著差异(n=6,P>)。本研究证实 HBV 3022nt-1787nt缺失突变体编码的TS'X'蛋白可抑制Huh7细胞对IFN-a的反应性,其活性与其N端TP及部分缺失的Spacer区有关。
关键词:3~8个,之间用分号隔开。
海分枝杆菌;转座子突变;斑马鱼;肉芽肿
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基金项目:国家高新技术研究发展计划(863)(2009ZZ06…)
通信作者:王文武
Corresponding autor. WANG Wen-Wu, E-mail: ******@fudan.
Establishment of a random PCR method for detecting bacteria
ZHANG Shan, LI Si, WANG Wen-Wu姓名用正体,其中,姓:用大写字母;名:首字母用大写,后面用小写,双名之间用-连接。
Journal of Microbes and Infection, Shanghai 200032, China单位用斜体。
Abstract:以非结构式(勿用“目的、方法、结果、结论”4要素形式)撰写,且应能独立反映文章的内容。篇幅为500个实