微柱凝胶免疫检测卡长春博迅.ppt

微柱凝胶免疫检测卡长春博迅
新生儿溶血病检测卡系列
新生儿溶血病（HDN）是发生在胎儿和新生儿的一种免疫溶血性疾病。
该病由母婴血型不合引起，轻者出现贫血、水肿、肝脾肿大，严重者造成
新生儿死亡或发生核黄疸且产生后遗症。准确的产旧血需设阴性对照）。
2、抗凝血样标本要上清澄清。如有纤毛状、浑浊、乳糜、溶血、脂肪等状，应
再次洗涤离心。为防止纤维蛋白影响红细胞沉降，建议使用红细胞稀释液。
3、血辫血样须放置试管中离心处理，确保血清澄清微黄。必要时需洗涤。
4、在18-25℃条件下平衡30分钟，防止冷凝集。
红细胞悬液的制备：
1、-%的悬液，最高浓度不要超过1%。如，取8微升压
积红细胞，加入到1毫升的红细胞稀释液中，%的红细胞悬
液。
2、外观检查呈均匀淡红色，无血块、无絮状物（如有纤维蛋白需去除）。
二、结果判定：
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合
物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中，为弱阳性反映；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
4+ 红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面
3+ 大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于凝胶中部
2+ 大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部
1+ 红细胞复合物位于凝胶中下部
± 与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为±
— 红细胞完全沉积在凝胶管尖底部
完全溶血 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色
不完全溶血 残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色
混合凝集 红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
反应强度
现象及说明
４＋　 ３＋ ２＋ ＋ ± － Ｈ Ｈ Ｍ
完全 不完全 混合凝集
三、标准操作规程：
1、ABO、RhD血型定型试剂卡（单克隆抗体）
操作步骤：
1）将准备好的试剂卡做好标记；
2）-%红细胞悬液分别加入1-4管中，各50µl；
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µl
50µl
3）将待检者血清分别加入5-6管中，各50µl；
4）-%的ABO血型反定型红细胞试剂悬液，分别加入5-6管中，各50µl；
50µl
50µl
50µl
50µl
待检者血清
A细胞
B细胞
5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；
6）肉眼观察结果。
结果：A型RhD阳性
2、ABO、RhD血型定型试剂卡（单克隆抗体）—红细胞抗原检测
操作步骤：
1）将准备好的试剂卡做好标记；
2）-%红细胞悬液分别加入第1—3或4—6管中，各50µl；
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µl
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µl
3）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）；
4）肉眼观察结果。
结果：；
3、ABO、RhD血型定型试剂卡（单克隆抗体）——Rh血型抗原检测
操作步骤：
1）将准备好的试剂卡做好标记；
2）-%红细胞悬液分别加入1—6管中，各50µl；
-%
红细胞悬液
50µl
50µl
50µ