hpv检测目的及最佳检测方法教学课件.pptx

hpv检测目的及最佳检测方法
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1、HPV检测的目的是什么？2、HPV检查的最佳方法？3、德同产品介绍
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主要内容
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■ 只是为了查有没有HPV病毒感染？ ■ 是为了查别，检测型别越多越好？NO ■是为了发现已经存在的CIN2+病变和预CIN2+ 的风险 人群？yes
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HPV检测的目的是什么？
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1、HPV检测的目的是什么？2、HPV检查的最佳方法？3、德同产品介绍
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主要内容
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HPV检查的最佳方法
直接核酸检测（无需PCR实验室）
杂交捕获技术 （HC2、DH1、DH2、DH3）
酶切信号放*** （Cervista）
核酸扩增后检测——PCR类技术（需PCR实验室）
膜杂交法
基因芯片法
反向点杂交法
流式荧光杂交法
荧光探针法
HPV DNA检测技术分类
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HPV检查的最佳方法杂交捕获技术 （HPV检测的金标准）产品德国凯杰的：HC2杭州德同的：DH2、DH3
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HPV检查的最佳方法
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杂交捕获技术 的三大优势：1、独特的探针技术：14 种全长 8000RNA 探针，避免因 区域片段（如 L1 区）丢失造成的假阴性2、无需DNA提取，无需核酸扩增，有效避免因环境因素造 成的假阳性3、统一的临 床 判 定 标 准≥，避 免 因方法 学灵敏度过高产生的假阳性，结果重复性好，准确可靠。
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HPV检查的最佳方法
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杂交捕获法独特的探针技术
HPV病毒基因组为环状双链DNA，含有~8000个碱基对
德同DH系列 HPV 检测“全长鸡尾酒”探针技术
HPV18
8000bp，基于全长，涵盖HPV DNA所有区域
2＋12种不同型别探针混合
准确，不漏诊
Cobas HPV& Abbott HPV(12+2 Real-time PCR)
“寡核苷酸探针”技术
HPV16
HPV18
12种HR通用探针
约200bp，仅基于L1片断，
非全长
仅3种探针混合
病毒基因缺失、突变会造成漏诊
其他国产PCR方法“ 寡核苷酸探针”技术
13种HR通用探针
约100-150bp，仅基于L1片断，
非全长
仅1种通用探针
病毒基因缺失、突变会造成漏诊
HPV16
12种HR通用探针
德同DH系列HPV 检测
“全长鸡尾酒”探针技术
Title, Location, Date
Cobas HPV& Abbott HPV(12+2 Real-time PCR)
“寡核苷酸探针”技术
其他国产PCR方法 “寡核苷酸探针”技术
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PCR和HC2的临床敏感性比较：
综合1999-2005年间的主要研究
基于CIN2/3/癌症的病例数〉1,500
%
PCR median 82%
HC2 median 94%
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“L1片段的缺失并不普遍，但是任何变异或缺失都会造成PCR的检测结果为阴性…”
Unger et al JHC 1998, 46(4): 535-540
“L1片段是病毒衣壳蛋白，在HPV病毒引发的肿瘤进展过程中是不必要的，因此很可能在HPV整合过程会导致L1片段的缺失”
Capone et al, Clin Cancer Research 2000, 6:4171-4175
“~5%的癌症和CIN3会因为HPV L1片段的缺失而无法被检测出来”
Lorincz (Methods for HPV Detection) ; Emerging Issues on HPV Infections: From Science to Practice, Monsonego 2006
HPV 病毒基因L1片段缺失
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PCR中β-球蛋白的竞争
β-globin
β-globin
β-globin
β-globin
β-globin
β-globin
β-globin
HPV
HPV
HPV
HPV
HPV
HPV
HPV
β-globin
HPV
HPV
β-globin
反应过程中的竞争会导致假阴性结果
“β-球蛋白和HPV以共同引物L1片段进行扩增，这样会降低HPV检测的敏感度”
Coutlee et al. JCM 2002; 40(