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液相数据处理new2
定量分析基本公式
Ci= fi Ai
Ci= fi Hi
被测组分的浓度与检测器的响应值，在某些条件限定下成正比的关系。
Ci： 组分浓度,
fi : 响应因子，与组分的物理化学性质和检测器的性液相数据处理new2
定量分析基本公式
Ci= fi Ai
Ci= fi Hi
被测组分的浓度与检测器的响应值，在某些条件限定下成正比的关系。
Ci： 组分浓度,
fi : 响应因子，与组分的物理化学性质和检测器的性质有关
Ai： 组分响应面积
Hi： 组分响应高度
实际修饰公式： Y=aX+b
定量分析的基本要求
需要有纯物质作标准
被定量组分峰要与其它峰达到基线分离
符合定性参数要求
选择合适的定量方法
定性方法
色谱峰的定性鉴别
通过保留值(通常是保留时间)进行定性
需要指定保留时间误差范围（时间窗、时间带）
在相同的分析条件下
保留时间相同并不肯定是同样的组份
保留时间不同肯定不是同样的组份
定性确证
仅仅通过保留时间并不能完全确证该物质
通过加入标准物确认
通过改变色谱条件确认
光谱和质谱信息也可以作为进一步确证手段
其他仪器方法确证
定量方法
面积归一化
外标法
内标法
标准加入法
面积归一化法
公式：
特点：
1）无需做校正，简便，快速
2）进样量不严格要求
3）所有组分都流出并且被检测到
4）所有组分的响应因子都相同
不能作为准确定量的方法，仅在特定情况下使用
外标法
浓度
C1
C4
C3
C2
浓度
面积
A1
A2
A3
A4
C1
C2
C3
C4
A1
A2
A3
A4
峰面积
标准曲线
外标法特点
特点：
1）不需所有峰都流出或被检测到
2）需要标准样品
3）进样量必须准确
4）仪器必须有良好的稳定性
5）只对所测组分作校正
是实验室最常用的定量方法，定量结果准确
数据处理参数
积分参数：（Width, Slope, Drift, ）
定性参数：保留时间及允许误差（时间窗，时间带）
定量参数：
定量方法：外标法、内标法、面积归一法等
曲线点数：一点或多点
曲线拟合：线性、折线、曲线
峰面积处理参数
峰面积处理参数
基本积分参数
Width：半峰宽，峰的半高宽，排除峰宽小于最小峰宽的峰
Slope：斜率，用来判断出峰起点、终点以及滤除低平噪声
Drift：漂移，判断相邻峰的积分方式
设定值为0时，积分仪将自动判断
如Drift与基线至峰谷连线较接近时，积分面积值可能变化较大
：时间变参，根据时间自动改变峰宽和斜率

Minimum area：最小峰面积，排除面积小于该值的峰
Slope的设定
Slope≈峰斜率，积分不稳定，须手动设定
Slope
Slope<峰斜率，作为峰计算
Slope>峰斜率，作为噪声滤除
Slope
Slope
Slope
Drift值的设定(自动校正)
谷宽<半峰高宽度
T2<T1
谷宽>半峰高宽度
T2>T1

：时间变参，根据时间自动改变峰宽和斜率
等度洗脱时，出峰时间越长，峰越宽
设定值为0时，根据宽度自动判断
默认值为1000，此时该参数不起作用
在实际使用中，一般使用默认设定
Integration Off to On：锁定某一时间范围的峰，使之不计算积分
积分锁定
Integration Off to On
拖尾处理
Tailing On to Off：强制执行拖尾处理
方法认证
准确度
精确度
重复性
中间重复性
重现性
检出限
检测限
线性范围
回收率
范围
稳定性
评价方法的典型参数
影响定量结果的因素
保留时间的重现性（对GPC影响很大）
样品问题（杂质、溶剂、稳定性、配制）
进样问题（准确度和精密度）
检测器的性能（影响线性、检出限、灵敏度）
方法的可靠性
积分参数的设定
表征色谱柱性能的参数
容量因子
理论塔板数
理论塔板高度
分离度
拖尾因子
容量因子, k’
t1 = 组分峰的保留时间
t0 = 死时间 (非保留时间)
t0
t1
k’ =
t0
t1 - t0
理论塔板数, N
中国/日本药典 :
N = x ( Rt / W 1/2 )2
美国药典 :
N = 16 x ( Rt / W )2
W
W1/2
H1/2
H
R