针刺对乳腺增生模型大鼠雌激素、雌激素受体及其信号传导的干预作用.doc

针刺对乳腺增生模型大鼠雌激素、雌激素受体及其信号传导的干预作用.doc针刺对乳腺增生模型大鼠雌激素、雌激素受体及其信号传导的干预作用
【摘要】【目的】观察针刺对雌激素介导的乳腺增生模型大鼠的影响。【方法】选用SD雌性未孕大鼠,随机分为4组:正常组、模型组、针刺组(电针膻中、三阴交穴)、西药组(灌胃三苯氧***05mg·kg-1·d-1);除正常组外,其他组均采用肌注己烯雌酚(剂量为05mg·kg-1·d-1)及黄体***(剂量为4mg·kg-1·d-1)方法复制乳腺增生模型;造模成功后针刺组及西药组治疗 30d,采集标本,检测各组大鼠体质量,第2对乳头高度,血清雌激素(E2)水平,雌激素受体(ER)、细胞外信号调节激酶(ERK)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达及乳腺组织形态学变化。【结果】各组大鼠治疗前后体质量、治疗前乳头高度差异无显著性意义(均P>005),治疗后模型组乳头高度显著增加(P﹤001),各治疗组可显著降低乳头高度(均P﹤005);模型组出现明显乳腺增生形态学改变,各治疗组可显著减少乳腺小叶腺泡数、腺泡腔直径及导管直径(均P﹤005或P﹤001);模型组大鼠血清E2水平,乳腺组织ER、ERK、eNOS蛋白表达阳性细胞数显著增加(均P﹤001),各治疗组可显著降低上述指标(P﹤005或P﹤001)。【结论】针刺治疗乳腺增生的作用可能与其能调节雌激素信号转导通路,抑制雌激素的促乳腺增生效应有关。
【关键词】乳腺增生/针灸疗法; 雌激素/血液; 乳腺/病理学; 信号转导通路; 疾病模型,动物; 大鼠
雌激素作为一种重要的女性激素,在乳腺的生理病理过程中有着十分重要的作用。乳腺增生具有明显的雌激素依赖性。雌激素能刺激乳腺组织增生,引起乳腺导管扩张和囊肿形成,是影响乳腺增生发生、发展及转归的重要因素[1-2]。雌激素通过靶组织中的雌激素受体发挥其生物学效应,在这一过程中雌激素信号转导机制起着关键性的作用[3]。本实验观察了针刺对雌激素介导的乳腺增生模型大鼠雌激素(E2)水平,雌激素受体(ER)、细胞外信号调节激酶(ERK)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。现报道如下。
1 材料与方法
11 实验动物选用清洁级SD雌性未孕健康大鼠40只,体质量220~240g,鼠龄3个月,由广州中医药大学实验动物中心提供,实验动物使用许可证号:SCXK(粤)20030001。饲养环境:广州中医药大学实验动物中心提供的清洁级动物实验房,动物实验设施使用编号:0005042。

12 药物和试剂与仪器己烯雌酚注射液(广州明兴制药厂生产,批号:103149);黄体***注射液(上海通用药业股份有限公司生产,批号:H31021401);三苯氧***(TAM,上海华联制药有限公司生产,批号:H10910072);苏木素(广州化学试剂厂生产,批号:20050918);伊红(南京化学试剂厂生产,批号:20051809);E2试剂盒由北京东雅生物技术有限公司提供(批号:20050625),检测仪器为上海日环仪器一厂SN695B型放免测量仪;ER、ERK、eNOS抗体及免疫组化试剂盒购自中山生物试剂有限公司广州分公司,ER、ERK、eNOS一抗工作浓度为1∶100;二抗、三抗、联苯二***(DAB)工作液购自武汉博