急性髓系白血病患者IDH1和IDH2基因突变的检测及临床意义.pdf

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靴敝储:米瑞半日期:乃年陆腥学位论文使用授权声明原创性声明日期:本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:
中文摘要急性髓系白血病患者虸蛲槐涞募觳饧临床意义背景与目的研究生米瑞华导师魏旭东郑州大学第一附属医院血液内科河南郑州造血祖细胞的获得性遗传和表观遗传学的改变足急性髓系白血病的发病因素之一,这些变化改变了造嫦赴ぁ⒃鲋澈头只腎;啤⒉∈惫撬柙枷赴刈乓恢只蛞陨系娜旧灞湟欤庑┍湟觳唤鍪恼锒媳曛荆瞧兰弁耆ɑ航饴⒏捶⒎缦白苌的指标。然而,国外资料表明,娜旧搴诵鸵斐<斐雎饰嵋】。因此,仍有一大部分颊呙挥蟹⑾秩旧灞湟欤庾榛颊呶:诵驼5.,是姓急壤疃嗟难切停聪赴糯Х治觯枪为预后中等组。临床观察发现,.榛颊咧校谎切停嗤牧俅仓瘟品桨福病的缓解状况、疗效和预后存在较大的差异,原因可能为患者潜在的分子生物学特征不同,即这些病人在分子学上是有异质性的,对患者分子预后指标的研究是近年分子学研究的热点,例如:目前研究的较为透彻的与发病直接相关的基因,如猂籈等;文献报道某些基因如亲病毒整合位点基因.、喙鼗、脑和白血病胞质基因⒛阅ち.、核转录因子①鹊墓泶锾崾净颊咴ず笙灾涣肌R有一些基因的突变与预后良好有关,如核磷蛋白基因、銮拷合因子仅基因/龋涣硗猓恍┗虻耐槐湟灿朐ず蟛钣泄兀鏔样酪氨酸激酶⑸瞿赶赴基因.⒒。急性髓系白血病患者和基囚突变的检测及临床意义形恼R
对象与方法酶体中【浚槐嗦胍览礜南吡L錓傅腎蛭挥谌旧.】。异柠檬酸脱氢酶易灏ń柚鶱或作为辅助因子,催化异柠檬酸的氧化脱酸反应生成仪.***戊二酸的酶类,同时分别生成或T诓溉槎锵赴校琁同工酶有以下三种形式:依赖南吡体览礜南吡L錓,依赖的胞质。编码依赖的人酶的基因位于染色体.⑶叶ㄎ挥柘赴屎凸趸尽管和都参与了细胞内氧化损伤的防御机制【浚獻谥实代谢机制中起了重要作用近年来,通过全基因组测序,发现和突变存在于⒓毙淋巴细胞白血病肮撬柙鲋承约膊中,~%【,并认为具有和突变的颊呔哂薪系偷腃细叩腞徒隙痰腛D壳肮谖醇朔蕉的研究报道。本课题采用结合基凶组测序技术,评估和基因突变在例患者中的发生频率和预后影响,并探讨这些基因的表达与细胞遗传学、分子危险度分层以及与谐<蛲槐涞墓叵怠月至年挛以好耪锛安》渴罩蔚踔蜛患者,所有患者均经癕确诊,染色体分析采用源际酰坷辽俜治个克隆。坷醴⒒颊呷」撬柩,行白血病免疫分型分析。单克隆抗体包括髓系相关抗原:,,珻,,,,和毫芟迪喙乜乖ǎ篊,珻,珻,琧珻,和;非特异性抗原包括瓺珻虲坷颊叱槿】鼓撬杌蛲庵苎,,细胞悬液置.℃保存。甀基因突变检测:按总崛∈约梁兴得魇樘崛∠赴躌;逆转录反应体系具体如下:急性髓系白血病患者和基冈突变的检测及临床意义,,形恼R
结果痷,从从μ跫#鎙鎙个循环;℃;R镄蛄腥缦拢篒虻外显子扩增引物,上游引物掠我┰霾;基因第庀宰永┰鲆铮掠我’,扩增产物保颐嵌訤甀、..型槐浼觳狻0囱R夯蜃崛∈约梁兴得魇樘崛;四种基因的从μ逑从条件为:℃;℃鎙鎙个循环;℃妗甀基因、外显子扩增引物,上游引物掠我扩增产物篎甌基冈第外显子扩增引物,上游引物’,下游引物.┰霾飈;甂基囚第外显子扩增引物,上游引物’,下游引物瓵’,扩增产物甈产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,对阳性标本按锎炕厥帐约盒说明书进行纯化回收,直接测序进行基因突变检测。旧褰峁颊咧校诵驼U缓诵鸵斐Uǎ簍;例,;例,.者者例,遧例,者丛雍诵例;检测失败者甀突变检测结果:例患者中未发现突变,突变例,突变例;未发现突变,突变突变的发生率为./籌槐涞姆⑸饰.%/瓼甀、.突变检测结果:,,妫鎙,℃;.
关键词:白血病,髓系,急性;突变;突变;预后结论例,一粜例,甂突变籉槐涞姆⑸饰./』颊咧械姆⑸饰%/。、甂突变的关系:槐涠喾⑸诤诵正常