培训课件：菌落总数的测定GB4789.2-2010-.ppt

食品卫生微生物学检验
菌落总数测定
-2010
平板计数法
一、定义
1 菌落(colony): 是指细菌在固体培养基上经培养后生长繁殖而形成的能被肉眼所识别的生长物集落,它是由数以万计的相同细菌集聚而成的。
2菌落总数:是指食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和时间)培养后,所得1g或1mL检样中形成的微生物菌落总数。以 CFU/g(mL)来表示。
a -2010的培养条件下所得结果,只包括一群在平板计数琼脂上生长的嗜中温需氧或兼性厌氧菌的菌落总数。
b 按国家标准方法规定,即在需氧情况下, 36 ±1℃培养48±2 h,能在平板计数琼脂上生长发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。
C 菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,也不能区分其中细菌的种类,只包括一群在计数平板琼脂中生长发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数,所以有时被称为杂菌数、需氧菌数等。
3、区分定义:细菌总数
,在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。细菌总数也称细菌直接显微镜数。通常以1 g或1 mL样品中的细菌总数来表示。
4 菌落总数测定的卫生学意义
食品本身的新鲜程度
加工储存运输过程中是否受到污染—卫生质量
卫生学指标:必须配合大肠菌群的检验和其他病原菌项目的检验,才能做出比较全面准确的评定。
---菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
--食品中细菌菌落总数越多,则食品含有致病菌的可能性越大,食品质量越差;菌落总数越小,则食品含有致病菌的可能性越小。须配合大肠菌群和致病菌的检验,才能对食品做出较全面的评价。
二、试验材料
1、 食品检样2、 培养基和试剂;
3、 设备和器具无菌培养皿、无菌吸管/移液枪及无菌枪头、电磁炉、均质器、电子天平、恒温培养箱、生物安全柜、冰箱、蒸汽灭菌器等。
三、试验流程
1、检样
2、做几个适当倍数的稀释液
3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加入灭菌平皿内
4、平皿内倾注15~20 mL琼脂培养基,混匀
5、36 ±1℃培养48±2小时或(24±2)小时
6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量
7、计算菌落总数→报告
菌落总数的检验程序图
检样:25g(ml)样品加入225ml稀释液,均质
10倍系列稀释
选择2~3个适宜样品匀液,各取1mL分别加入无菌培养平皿内
每皿内加入适量(15-20ml)培养基(PCA),混匀,培养
菌落计数
36±1℃
48±2h
报告