ISE Module 使用中的问题.docx

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如何延长电极的使用寿命,提高电极使用的稳定性?
◊提高标本的质量。
—加电极膜和电极测量仓的污染,因此会导致需要更加
频繁的维护来清洁电极。
标本凝集时间不够,导致标本在测量时凝集。
标本离心不好(时间,转数等要求)。
乳糜血标本太多。
含凝胶促凝管的使用中离心处理不好。
◊水质要求。
要求为低电导率的无菌水。
◊试剂处理要求。
:殳用完的试剂残余到入新的试剂瓶中。
◊电极在保养完成之后,严格要求进行活化处理。
◊在使用条件保证良好的情况下,可以适当延长ISE保养的时间间隔。因为频繁的保养程序会降低电极膜的敏感度。
丄对于电极使用的理想状态是:
■最低的保养频率,最低的定标频率,却能够保证最好的质控结果以及使用状态。
如果要对于使用的ISEModule使用熟练于心,需要很多的背景知识:
检测原理:
ISEModule的检测应用的是间接法(标本稀释后检测),目的是延长电极的使用寿命。
检测的宗旨是:离子选择电极在对于待测离子产生电位相应后,产生的电动势符合Nernst原理:
EMF=(EMF)0+*(RT/nF)*log(ai)
(ai)=f*(Ci)
测量程序:
测量内标液。
测量标本。
漂移补偿。
■需要注意的是:虽然内标液和标本一样连续被检测,但是内标液是不需要稀释的!标本,质控品和定标液都是需要稀释31倍后才检测的!
因为标本和内标液同时检测,所以很容易鉴别一些问题的原因:
♦例如:当质控超出限制时,通常首先要做的是重新做一次定标;然后将新的定标报告与上一次的定标报告比较,观察IS-MV和IS-浓度。如果IS-MV没有明显的变化,IS-浓度的变化明显,那可以肯定的是ISE电极部分是没有问题的,隐藏的问题在于标本处理过程(标本探针是否堵了等)。如果IS-MV有明显改变,而IS-浓度没有变化,则问题出在ISE测量系统(检查参比电极液,电极等)。
对于内标液的浓度的要求并不是非常严格的,只要在两点定标的时候,它是稳定的就可以拉!
更换内标液,需要重新进行两点定标。
在标本检测前后加入内标液检测的目的是什么?
在标本检测的前后均需要检测一次内标液,目的是纠正漂移补偿。
避免标本长时间在电极测量仓中保留,以免污染电极。
:
最左边的电极是参比电极:在4mol/l的饱和的KCL的环境中,该电极保持一个稳定的电动势,不会受到任何离子浓度的影响。
右边的是检测电极,两种电极之间通过盐桥联系在一起。:
斜率定标Slope:两点定标(电极敏感度)
因为电极的敏感度的改变一般是比较慢的,所以两点定标并不需要特别的频繁。在理想的状态下,每周1-2次就足够了!
但是,因为存在这可能的污染情况(例如带有凝胶的原始标本管没有处理好),会影响定标稳定性,需要加大定标的频率。
1-点定标(内标液)需要每天进行更正。
当在以下的条件下需要进行两点定标:仪器受到不正常的污染;试剂的更换,保养后,仪器没有进行彻底的活化等情况下,需要进行两点定标。
◊漂移定标(offset):一点定标
offset是一个更加容易改变的指标(例如温度的改变造成等),这就造成需要进行频繁的一点定标。
对于在每个标本检测前后检测内标液,实际上就是来监控漂移带来的补偿(间接的1-点定标)
5,补偿的原则:
补偿内部系统的改变(温度漂移,电极老化,试剂使用后状态的改变,污染等)
补偿外部系统的改变。
S3-标准值能够在2点定标的时候测定出来。
该值与输入的S3的结果的差值,为系统的补偿值,该值将计入每一个标本结果中。
■报告出来的ISE的结果=试剂的ISE结果+补偿值
6,ISE定标结果的解释:
TestISEMFS1EMFS2EMF
CVALUE
NAmVmVmV
mmol/l
K
SLOPEISCONC
mVmmol/l
S3CONCmmol/l
测量的数据,取决于电极直接读取的数据
根据定标结果,计算的数据
根据输入值,计
算的相应数据
操作者必须能熟练的理解整个定标报告,尤其是IS,S1-,S2-EMF的mV之间的关系。
:稀释错误
假设由于标本探针有部分堵塞,那么对于定标报告的数据会有如何的影响呢?丄由于标本探针的影响对于S1和S2的影响会很接近,所以造成定标的斜率的改变会很小
丄但是由于内标液本身检测时候并不需要进行稀释,所以对于内标液的浓度会造成很大的变动(偏高)。
丄IS的EMF值会基本保持不变。S1,S2的EMF值会有较大的改变。
采取的措施:
丄清洁标本探针内壁和外壁
检测标本探针在ISE-DilutionVessel中的位置。
:电极的敏感度下降假设电极使用时间过长,并且已经严重的被污染,会产生什么样的定标报告呢?丄IS的浓度基本应该是正常的。
丄但是SLOPE下降的却比较明显(因为对于S1和S2之间的信号的差别变小)
如果Slope的值一天之间有个突然的变化,最可能的原因有:
丄真空吸管吸取的DilutionVessel中的液体不完全。
这样造成S1/S2与IS液体发生混合,致使S1的浓度偏高,S2的浓度偏低,使两者间的差异缩短。
这种情况下,重复定标会发现,IS的EMF值重复性交叉,因为IS同样被S1/S2混合了。
如果电极仍然在正常的寿命期限内,slpoe却在很短的时间范围内(2-3天)有很大的变化,主要原因可能是:
由于标本质量差造成电极以及检测仓发生严重的污染。
采取的措施:
丄完全清洁系统,活化系统,重新定标。
阅读定标报告的程序:
检查ISCONC值:
,内标液的浓度值应该位于S1和S2值之间。
NA:140+/-5mmol/l;K:+/-;Cl;100+/-5mmol/l
如果CONC的结果不正常,继续检查IS,S1,S2的EMF结果?
如果CONC的结果正常,接续检查SLPOE?
ISEMF-S1EMF=S2EMF-ISEMF(+/-1mV)
如果IS,S1,S2的EMF值正常,继续检查SLPOE?
如果不正常,比较前一次的定标结果,看看有什么改变,是IS的EMF值改变了,还是S1,S2的EMF值改变了?
检查Slope
斜率正常
斜率不正常,检查S1/S2EMF值。看看是否S2-S1的值明显缩短了?
检查C值是否明显的与上次定标的结果有不同,或者和能够接受的程度之间有偏差。
C值正常,则定标通过。
C值不对,检查S3-补偿液是否正确?
2:如果IS的浓度不正常,IS的EMF值明显的偏离S1/S2EMF值一方。
ISCONC太高,ISEMF正常,S1-/S2-EMF都不正常的偏低。
A)由于标本量不足,造成稀释错误
检查标本探针在ISEdiluentVessel中的位置。
检查标本探针垂直方向的运动位置,保障能够接近Diluentvessel的底部。
检查标本探针是否有堵塞。
检查标本探针和管路之间是否有泄漏。
检查标本注射器的密封圈。
ISCONC太高,ISEMF太高,S1-/S2-EMF正常
A)IS的配比稀释有问题,IS的浓度是真正的偏高。
检查IS液(使用时间过长/挥发、过期、污染、试剂混用)
水的质量不合格
ISCONC太低,ISEMF正常,S1-/S2-EMF都不正常的偏高。
A)由于标本量加入增多或者稀释液不足造成稀释错误
使用的是旧的,挥发了的S1/S2液体。S1/S2被分装为小份,但是容器没有密封。
标本探针的外壁是否葬了,以致于标本携带太多。
稀释液注射器密封圈
ISCONC太低,ISEMF不正常,S1-/S2-EMF正常A)IS浓度太低

ii・检查IS的稀释过程。

Slope太高(>)
a)新的电极,活化的不够
活化:质量好的清亮的血清标本运行10份
重新定标。
Slope太低。S1-/S2EMF同上一次的定标相比有明显下降。
a)S1/S2在稀释过程中与IS发生混合,原因是喷嘴在ISEdilutionVessel中吸的不干净。
检查喷嘴
重新定标,检查。
Slpoe太低,S1-/S2-EMF差值在几天内逐渐下降,但是电极还在使用的有效期内。
a)由于改使用了带有凝胶的原始管造成的很强的内电极膜污染。
检查标本的质量(正确的离心,正确的标本处理)
ISE执行额外的清洁保养
活化,重新定标。
错误的执行了清洁保养程序
检查ISE保养用的4N-NaOH是否合格。
检查保养液是否在仪器中停留时间过长(仪器在保养中途被停机)。
执行启动Prime
使用10-20份标本进行活化处理。
重新定标。
Slope太低,S1/S2之间的EMF差值逐渐降低,电极接近寿命的极限
a)更换电极。
ISE-Module的数据报警
Condi
屏幕显示
/*
报警符号
Conditioningerror(活化错误)
描述:
斜率超出范围:
Na+,K+:>
Cl-:<
原因:
新的电极活化的不是彳艮好。
标准品的LOW/HIGH的浓度不正常。
解决办法:
运行10份质量好的血清标本。
丄准备新鲜的定标液(),重新定标。
Std
屏幕显示:
D*
在定标报告中显示出来。
报警信号:
内标液(InternalStandardconcentrationAbnormal)浓度不正常。
描述:
内标液的浓度超出以下的范围:
Na+:-,K+:-
Cl-:80-120mmol/l
原因:
仪器的流路被污染试剂变质
解决办法:
丄如果定标报告中的IS的EMF值不正常,检查内标液的准备过程。如果必要的话,准备新鲜的试剂,进行多遍灌注以及重新定标。
丄如果定标报告中的IS的EMF值正常,检查ISE标准品和稀释液的注射器。理想的IS的EMF应该位于calibratorHigh/Low的EMF值之间。理想的IS的浓度应该为Na+:140mmol/l,K+:5mmol/ICI-:100mmol/l
Level
屏幕显示
L
报警信号
LevelError
描述
在IS的测量过程中,EMF值超出下列的范围
Na+:--10mV,K+:--10mVCl-:80to160mV
原因:
试剂量不足
检查参比电极及其连线丄检查盐桥解决办法
检查试剂量,确保试剂进样管路在试剂瓶中。
检查ISE的试剂流路中是否有过多的气泡。
检查加样针和电极的连接是否有泄漏。
检查盐桥,必要的话清洗盐桥。
更换参比电极液(Referenxesolution),运行ISE灌注,重新定标。
运彳亍Utility/Maintainance中的ISECheck。如果所有的值都太低或者太高,更换参比电极。EMF的值必须在一7mVto7mV之间。所有电极之间的偏差不能超出+/-2mV。如果只有某一个电极超出范围,更换相应的电极。
运彳亍ISE灌注。运行10次标本活化。
Magin
屏幕显示
R*
在定标报告中显示。
报警符号:
ISEslopemarginal(ISE斜率处于边缘)
描述
该斜率值在下列范围之内:
Na+:45mVto49mV
,K+:45mVto49mV
Cl-:—-
原因;
电极老化丄流路污染
解决办法
质控在范围内吗?
YES:继续试验
NO:更换电极
Noise
屏幕显示:
NoiseError
描述:
几次检测之间的最大的EMF之间的差异超出:
Na+:
,K+:
Cl-:
原因:
ISE试剂流路中有气泡
盐桥有泄漏。
解决办法:
检查试剂量是否充足
检查试剂的流路中是否有气泡。检查加样针,注射器,电极以及盐桥是否有泄漏。如果只有一个电极受到影响,检查该电极。如果所有的电极均受到影响,检查参比电极。
Resp1
屏幕显示
报警符号:
Responseerror1
描述:
A值超出下列的范围:
Na+:>
,K+:>0,107"
CI-:>
原因:
流路被污染。
电极被污染,或者使用时间太长。
解决办法:
执行Utility/MAintainance中的ISE的SystemWash.
运行10份高质量的标本。
更换新的定标液。
Resp2
屏幕显示
・*
报警符号:
Responseerror2
描述:
A值超出下列的范围:
Na+:>
,K+:>0,160
CI-:>
原因:
流路被污染。
电极被污染,或者使用时间太长。
解决办法:
执行Utility/MAintainance中的ISE的SystemWash.
运行10份高质量的标本。
更换新的定标液。
Slope
屏幕显示
E*在定标报告中显示*.报警信号:
SlpoeAbnormal(斜率不正常)
描述:斜率超出下列的范围:
Na+,K+:<
Cl-:》
可能的原因:
电极使用时间过长
Low/High标准液的位置放错了。
标本探针被堵住。