DNA的粗提取与鉴定(学案).pdf

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学案类型:新授课导学案材料序号:
②加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
编稿教师:审稿教师:③如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?
④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
2)溶解细胞核的DNA:
向收集的滤液中加入的溶液,搅拌使DNA呈溶解状态。
3、去除滤液中的杂质
【学****目标】方案一的原理是DNA在不同浓度溶液中溶解度不同;
(一)知识目标方案二的原理是蛋白酶分解,但不分解;
知识与技能:1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。方案三的原理是和的变性温度不同。
2、理解DNA粗提取与鉴定的原理思考:①为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
过程与方法:掌握DNA如提取计数,能利用DNA的性质进行实验设计和操作②方案二与方案三的原理有什么不同?
情感态度与价值观:通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培4、DNA的析出与鉴定
养实事求是的科学态度。将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积、冷却的,静置,溶液中会出
(二)重点和难点:重点:DNA的粗提取和鉴定方法现,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上
难点:DNA的粗提取和鉴定方法面的水分。
【课前预****取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支
(一)实验原理:试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的
。混合均匀后,将试管置于中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液
提取生物大分子的基本思路是。对于DNA的粗提颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变。
取而言,就是要利用、等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去
【课内探究】以鸡血细胞DNA的提取和鉴定为例
除其他成分。:,离心处理;
1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同,:向鸡血细胞液中加入蒸馏水,搅拌、过滤;
特点,选择适当的盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。讨论1:加入蒸馏水的目的是什么?为什么能达到此目的?
2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有影响。
o
大多数蛋白质不能忍受60—80C的高温,而DNA在以上才会变性。洗涤剂能够瓦解,:加入2mol/L的***化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态;
但对DNA没有影响。:加入蒸馏水,用玻璃棒搅拌;
3)DNA不溶于,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进
讨论2:此时加入蒸馏水的目的是什么?
一步提取出含杂质较少的DNA。
:DNA遇(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯***可以作为鉴定DNA的试剂。
(二):过滤;
1、实验材料的选取凡是含有的生物材料都可以考虑,但是使用的生物讨论3:这次过滤与上次过滤的目的一样吗?为什么?
组织,成功的可能性更大。
2、破碎细胞,:加入2mol/L的***化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态;
1)制备和提取细胞核物质:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例。***化钠溶液:过滤;
在鸡血细胞液中加入一定量的,同时用搅拌,得到鸡血细胞液。过滤后收集研磨讨论4:这一步骤的目的是什么?
液;如果实验材料是植物细胞,需要先用溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在
切碎的洋葱中加入一定的和食盐,进行充分的搅拌和研磨。过滤后收集研磨液。讨论5:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
思考:①为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
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:加入冷却的95%的酒精,搅拌;()
讨论6:这一步骤的目的是什么?
***化钠溶液后,还要用酒精处理,:
()
讨论7:为什么加入的酒精需要冷却的?
,而滤液中某些杂质不易溶于酒精
,而滤液中某些杂质易溶于酒精
讨论8:本实验中有三次过滤:⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液⑵
⑶过滤溶解有DNA的2mol/
以上三次过滤分别为了获得(),采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质。用
A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液蛋白水解酶处理血样的目的是()
B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、
C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、
D含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、,使DNA释放,便于进一步提纯
【突破训练】,不断加入蒸馏水的目的是()
()
,,加快杂质的析出
,DNA遇()会被染成蓝色。
Ⅲ***
,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()

,对DNA的提取量影响最小的是()
,,放出DNA等核物质
用到蒸馏水,其作用在于(),要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌
,“析出DNA粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加
,,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却
,,需要向血液中加入(),防止血液凝固。
,
,提取含杂质较少的DNA时必须用(),也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料的
?请回答下列问题:
%⑴鸡血细胞中红细胞,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中
“DNA的粗提取与鉴定”实验中,有两次DNA的沉淀析出,其依据的原理()细胞数目较多,可以提供丰富的。
①DNA在***⑵实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是
②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出。
①②⑶生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后,结果
①,第二次是②②,第二次是①是,这是因为这些动物和人一样,成熟的红细胞中,
,下列所采取的措施中,最恰当的是:向经抗凝剂处理的鸡血细
但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行。这是因为
胞液加入()
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。
⑷若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加程序,使组织细胞更易分离。
DNA的粗提取与鉴定参考答案
1—5CBCCA6--9CBDC10--13DBBC
1因为上清液是血浆,不含有血细胞,DNA存在于试管底部的鸡血细胞的细胞核中
2⑴蒸馏水⑵2mol/LNaCl溶液⑶蒸馏水⑷2mol/LNaCl溶液⑸冷却的95%的酒精
⑹二苯***
3.⑴含细胞核;红;DNA⑵鸡血细胞液中DNA相对含量⑶很难提取到DNA;无细胞核;
肝细胞有细胞核⑷研磨
取1个50ml烧杯,向烧杯内注入***化钠的物质的量浓度为2mol/L的溶液20ml。用钝头镊子将纱布
上的粘稠物夹至***化钠溶液中,用玻璃棒不停地搅拌,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中。
***化钠溶液
取1个100ml烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液。取其滤液,DNA溶于滤液中。

在上述滤过的溶液中,加入冷却的、酒精的体积分数为95%的溶液50ml(使用冷却的酒精,对DNA
的凝集效果较佳),并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含有杂质较少的丝状物。用玻璃棒将丝状物卷
起,并用滤纸吸取上面的水分。这种丝状物的主要成分就是DNA。注意观察丝状物是什么颜色(白色)。

取两支20ml的试管,各加入***,将丝状物放入其中
一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯***试剂。混合
均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。
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