毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用.doc

毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用 .doc毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用
陈晓白韩余健许潘健甘耀坤王晓平赵仕花
【摘要】目的观察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将毛鸡骨草醇提取液与等容量、滴度为1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合,使混合后毛鸡骨草的浓度分别为96,48,24,12和6 g/L,用磷酸缓冲液与1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合作空白对照。每组6管, 37℃水浴8 h和16 h后,采用ELISA法测定HBsAg和HBeAg的OD值,观察其对HBsAg或HBeAg的抑制作用。结果毛鸡骨草醇提取液对血清中HBsAg和HBeAg 均具有抑制作用,可使HBsAg和HBeAg的浓度降低,呈现一个明显的量效和时效反应关系。其中毛鸡骨草在作用16 h,浓度为96,48 g/L时对HBsAg,HBeAg抑制作用最为明显(P<)。结论毛鸡骨草在体外有较明显的抗HBsAg和HBeAg作用。
【关键词】毛鸡骨草乙型肝炎表面抗原(HBsAg) 乙型肝炎E抗原(HBeAg) 抑制
鸡骨草Abrus cantoniensis Hance和毛鸡骨草Abrus m ollis Hance为豆科相思子属植物,是常用的中药材,亦是我国出口中草药品种之一〔1〕。具有清热解毒、利湿、活血化瘀、舒肝止痛等功效,临床上多以复方入药,可用于黄疸、胁肋不舒、胃脘胀痛、急慢性肝炎、乳腺炎等症,特别是在肝胆疾病治疗方面应用广泛,并取得较好的效果。中国的广东、广西等地有丰富的鸡骨草资源,广西玉林制药有限责任公司生产的保肝护胆良药“鸡骨草胶囊”就是以毛鸡骨草为主要原料。为了更好地开发、利用广西这一丰富的中草药资源,进一步明确毛鸡骨草抗肝炎病毒的作用,为临床治疗病毒性肝炎提供更确切的理论依据,本文采用体外研究方法,以乙肝病人血清为研究对象,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)技术,观察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。
1 材料与仪器
药物与试剂毛鸡骨草由广西玉林制药有限责任公司提供;HBsAg检测试剂盒(酶联免疫吸附试验;ELISA),批号:200706003;HBeAg检测试剂盒(酶联免疫吸附试验;ELISA),批号:200708008。 HBsAg检测试剂盒和HBeAg检测试剂盒均为北京科卫临床诊断试剂生物技术有限公司产品。乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒E抗原(HBeAg)阳性血清6份,由广西玉林市红十字会医院检验科提供。
仪器与设备RT—2100C型酶标仪(深圳雷杜生命科学服务公司生产);RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);℃水浴中回流提取3 h,取出提取液,再次用300 ℃水浴中回流提取3 h,合并提取液,用旋转蒸发仪将提取液浓缩至10 ml,使样品液浓度为3 g/ml。
ELISA(酶联免疫吸附实验)法定量检测HBsAg和HBeAg 3 结果
毛鸡骨草在体外对HBsAg的抑制作用采用ELISA法,检测毛鸡骨草醇提取液在作用HBsAg滴度为1:64的肝炎血清8,16 h后血清中HBsAg的含量。与空白对照组相比较,毛鸡骨草醇提取液与肝炎血清作用8,16 h后,毛鸡骨草浓度为6,12,24,